Condotto controllo sanitario e batteriologico mirato di prodotti alimentari, dilavamenti da oggetti ambiente, l'acqua consente di effettuare efficacemente una sorveglianza sanitaria ed epidemiologica continua e fornisce una valutazione obiettiva del rispetto del regime. Aiuta a chiarire le vie di trasmissione delle malattie infettive. Errori nel campionamento possono portare ad un'errata valutazione igienica dei campioni oggetto di studio utilizzando i metodi di ricerca più sensibili e accurati, e di conseguenza ad una valutazione inadeguata dell'oggetto stesso.

Pertanto, uno dei principi fondamentali della ricerca microbiologica è il campionamento corretto, rispettando rigorosamente le regole di campionamento e il loro rapporto quantitativo.

I principali documenti per il campionamento dei prodotti alimentari per studi microbiologici sono:

GOST R 54004-2010 “Prodotti alimentari. Metodi di campionamento per test microbiologici"
GOST R 53430-2009 “Latte e prodotti della lavorazione del latte. Metodi di analisi microbiologica"
GOST R ISO 707 - 2010 “Latte e prodotti caseari. Guida al campionamento"

Caratteristiche del campionamento degli alimenti secondo GOST R 54004-2010:

1. Prima del campionamento, sulla base dell'ispezione visiva, le unità di imballaggio o i prodotti sono divisi in 3 gruppi e il campionamento viene effettuato separatamente per ciascun gruppo:

Normale secondo aspetto(nessun segno di deterioramento microbico)
- sospetto (con segni di anomalie che possono insorgere sia a seguito di alterazione microbica sia a seguito di reazioni chimiche o biochimiche nel prodotto)
- prodotti avariati all'ispezione dei quali sono stati riscontrati difetti evidenti del prodotto (bombature, muffe, muco, ecc.). I prodotti con durata di conservazione scaduta non vengono selezionati per la ricerca.

2. I campioni vengono prelevati utilizzando strumenti sterili in contenitori sterili, il cui collo viene bruciato nella fiamma di un bruciatore (vasetti sterili o sacchetti sterili, contenitori di plastica sterili).

Se viene effettuato un campionamento di routine e viene formato un campione, il campionamento per l'analisi microbiologica dovrebbe precedere il campionamento per gli studi organolettici e fisico-chimici, osservando le regole asettiche che escludono la contaminazione al momento della raccolta del campione.

3. Il volume (peso) del campione è determinato in conformità con la documentazione tecnica per questo tipo prodotti. Il numero di unità di imballaggio è stabilito dalle norme vigenti, OST, TU, ecc. per i prodotti corrispondenti.

4. Se il peso del campione è uguale al peso del prodotto nel contenitore del consumatore, utilizzare l'intera confezione. Se il peso del campione è più di un collo, vengono prelevati più colli, altrimenti (in assenza di imballaggio), il campione viene prelevato prelevando campioni puntuali da luoghi diversi.

5. Se la massa (volume) del prodotto non è stabilita dalla documentazione normativa, prelevare almeno 1 campione dai prodotti nell'imballaggio di consumo e fino a 1000 g (cm3) dai prodotti nei contenitori di trasporto (grumi, liquidi, pastosi, granulari e consistenza mista). Quando si prelevano campioni da prodotti in pezzi di peso superiore a 1000 g, viene utilizzato uno dei seguenti metodi:

• tagliare o ritagliare una parte del prodotto con un coltello o altro strumento, mentre per i prodotti di forma rettangolare il taglio viene effettuato perpendicolare all'asse longitudinale, e per quelli sferici - a forma di cuneo;
• il prodotto viene tagliato in più punti con un coltello, quindi con un bisturi si prelevano il numero necessario di pezzi dalla superficie tagliata e dalla profondità, che vengono trasferiti con una pinzetta in un contenitore a bocca larga;
• tagliare lo strato superficiale del prodotto ad uno spessore di 0,5 - 1 cm e, utilizzando una sonda o un attrezzo apposito, spremere il prodotto in un contenitore a collo largo.

6. I campioni di prodotti congelati vengono posti in contenitori isolati o con refrigeranti. La temperatura di tali campioni durante il trasporto non deve superare i meno 150°C. I campioni di prodotti deperibili vengono trasportati a 50°C in borse frigo con refrigeranti per non più di 6 ore. Negli altri casi, sono guidati dalla documentazione normativa e tecnica per ciascun tipo di prodotto.

7. Il campionamento del latte e dei prodotti lattiero-caseari viene effettuato in conformità con: GOST 26809-86 “Latte e prodotti lattiero-caseari. Regole di accettazione, metodi di campionamento e preparazione dei campioni per l'analisi. Se il prodotto è presentato in confezione di consumo, viene selezionata 1 unità di confezione di consumo. Quando si compila un campione combinato, ad esempio la ricotta: da ciascuna unità di contenitore per il trasporto vengono prelevati 3 campioni puntiformi: 1 dal centro, gli altri 2 a una distanza di 5 cm dalla parete laterale. La massa selezionata viene trasferita in un contenitore sterile, costituendo un campione combinato del peso di 500 g. Quando si determina il numero di bifidobatteri nei prodotti a base di latte fermentato, vengono selezionate mediante campionamento casuale 3 unità di confezione di consumo. Gli studi microbiologici dovrebbero iniziare non più di 4 ore dopo il campionamento, se i campioni sono stati trasportati a una temperatura non superiore a 6 0 C e i campioni di gelato - non superiori a 2 0 C.

8. Campionamento di prodotti ittici - in conformità con GOST 31339-2006 "Pesce, oggetti non ittici e prodotti da essi"

9. Prodotti a base di carne secondo GOST R 51447-99 "Carne e prodotti a base di carne"

10. Carne di pollame, sottoprodotti di pollame e prodotti semilavorati in conformità con GOST R 50396.0-92 "Carne di pollame, sottoprodotti di pollame e prodotti semilavorati".

9. Quando si campionano i prodotti negli esercizi di ristorazione pubblica, si dovrebbe essere guidati dalla MU n. 2657 "Sul controllo sanitario e batteriologico negli esercizi di ristorazione pubblica e di vendita al dettaglio di alimenti".

Se si preleva un campione di un piatto dalla postazione di servizio, l'intera porzione viene trasferita dal piatto al barattolo; se in cucina viene prelevato un campione da una grande massa di prodotto (da una padella, da un grosso pezzo di carne), viene prelevato un campione del peso di circa 200 g (piatti liquidi - dopo accurata miscelazione; densi - da luoghi diversi nel profondo del pezzo). Le bevande minerali, le bibite analcoliche e la birra vengono selezionate nella quantità di 1 bottiglia di confezione di fabbrica o 200 ml di una bevanda prodotta in azienda.

Quando si preleva un campione di un prodotto di consistenza complessa, deve contenere tutti i componenti nello stesso rapporto del prodotto originale. Se necessario, ciascun componente viene selezionato separatamente.

I prodotti sfusi vengono accuratamente miscelati prima del prelievo dei campioni oppure il campione è costituito da campioni puntuali.

10. Tutti i campioni sono dotati di etichette che, oltre al numero del campione e al nome del prodotto, devono indicare la data e l'ora del campionamento, nonché la data e l'ora di produzione, e la durata di conservazione del prodotto. I campioni sono sigillati o sigillati.

11. Nel corso del processo di campionamento viene redatto un protocollo di campionamento e un rinvio alla ricerca, indicando il motivo del campionamento (programmato, non programmato, ricerca epidemiologica, ecc.) e indicato lo scopo del test di conformità:

Requisiti sanitari-epidemiologici e igienici unificati per le merci approvate. 28/05/2010 per il n. 299

TR CU 02\2011 “sulla sicurezza alimentare”

SanPiN 2.3.2.1078-01 “Requisiti igienici per la sicurezza e valore nutrizionale prodotti alimentari"

Regolamento tecnico della legge federale per il latte e i prodotti lattiero-caseari n. 88-FZ del 12 giugno 2008

Norme tecniche della legge federale per prodotti petroliferi e grassi

Norme tecniche della legge federale per i succhi di frutta e verdura n. 178-FZ del 27 ottobre 2008

Istruzioni sulla procedura per l'indagine, la registrazione e l'esecuzione di test di laboratorio nelle istituzioni del servizio sanitario ed epidemiologico per l'intossicazione alimentare n. 1135-73 g

I requisiti sanitario-epidemiologici e igienici unificati per le merci soggette a supervisione (controllo) sanitario-epidemiologica sono stati sviluppati al fine di attuare le disposizioni dell'accordo dell'unione doganale sulle misure sanitarie dell'11 dicembre 2009.

Vampate.

Secondo MU n. 2657 del 31 dicembre 1982 "Sul controllo sanitario e batteriologico negli esercizi di ristorazione pubblica e del commercio alimentare".

Nella pratica dell'attuale supervisione sanitaria delle unità di ristorazione delle istituzioni per bambini, scuole materne e adolescenti, nonché dei buffet, il metodo di lavaggio è ampiamente utilizzato per monitorare l'efficacia del trattamento sanitario di attrezzature, attrezzature, utensili, indumenti sanitari e personale mani. La metodica del tampone consente di valutare oggettivamente lo stato di conservazione igienico-sanitaria degli istituti oggetto di indagine.

Quando si eseguono i lavaggi, viene prestata particolare attenzione al monitoraggio delle attrezzature e delle attrezzature utilizzate lungo il percorso. processo tecnologico preparazione di prodotti che non sono soggetti ad ulteriore trattamento termico (cella frigorifera).

Il controllo batteriologico utilizzando il metodo di lavaggio dalle superfici dell'inventario, delle attrezzature, delle mani e degli indumenti sanitari del personale può perseguire due obiettivi:

a) accertare l'efficacia della sanificazione; a tal fine, le attrezzature, le mani e gli indumenti sanitari del personale vengono lavati prima dell'inizio del lavoro, o, se ciò non è possibile, durante le pause, dopo che le mani e le attrezzature sono state igienizzate, ovvero. i tamponi sono realizzati con oggetti puliti.

b) determinare il ruolo delle attrezzature e delle mani del personale nella contaminazione batterica di un prodotto o di un piatto finito durante il processo produttivo, prestando attenzione a Attenzione speciale per la produzione di prodotti e piatti pronti sottoposti a trattamento termico o consumati senza pretrattamento (alcune verdure, prodotti gastronomici, insalate, vinaigrette, ecc.). Per risolvere questo problema, contemporaneamente al prelievo dei tamponi, vengono prelevati campioni ripetuti di prodotti alimentari (i tamponi vengono prelevati da mani e superfici non trattate).

Il risciacquo viene effettuato dalla superficie con un tampone di cotone sterile inumidito montato su un supporto di vetro o metallo montato su un tappo di garza di cotone della provetta. La provetta contiene un terreno sterile. Immediatamente prima del lavaggio, il tampone viene inumidito immergendolo nel liquido. Quando si effettuano i tamponi è necessario tenere conto delle seguenti raccomandazioni:

• In termini di attrezzatura, dovresti prestare attenzione ai taglieri, ai tritacarne e ai tavoli per la produzione di prodotti finiti.
• I lavaggi per le mani, gli indumenti sanitari e gli asciugamani vengono prelevati dai lavoratori che manipolano prodotti non soggetti a ulteriore trattamento termico.
• I dilavamenti di apparecchiature di grandi dimensioni vengono prelevati da una superficie di 100 cmq. Uno stencil di 25 cmq viene applicato in 4 punti diversi sulla superficie dell'oggetto controllato.

Quando si prelevano tamponi da piccoli oggetti, l'intera superficie viene lavata via. Si effettuano i lavaggi:

• un tampone da 3 oggetti con lo stesso nome (piatti, cucchiai, ecc.). I vetri vengono puliti dalla superficie interna e dal bordo esterno superiore 2 cm verso il basso.
• Quando si prelevano i tamponi dalle mani, pulire le superfici palmari di entrambe le mani con un tampone, strofinando almeno 5 volte su ciascun palmo e dita, quindi pulire gli spazi interdigitali, le unghie e gli spazi subungueali.
• Quando si prelevano indumenti igienici, pulire 4 aree di 25 cmq - parte inferiore ciascuna manica e 2 piattaforme dalle parti superiore e centrale del pavimento anteriore. Asciugamani – 4 zone da 25 cmq.

Quando si prelevano i tamponi, annotare in ordine il numero del campione e il luogo in cui è stato prelevato il tampone. Il verbale di prelievo del tampone viene redatto in 2 copie.

Tempi di consegna: non più di 2 ore. Se i tempi aumentano, consegna in contenitori termici.

Campionamento di acqua per ricerche microbiologiche

La selezione, conservazione, stoccaggio e trasporto dei campioni di acqua vengono effettuate:

Secondo GOST R 53415-2009 “Acqua. Campionamento per analisi microbiologiche”;

Secondo GOST 31942-2012 “Acqua. Campionamento per analisi microbiologiche”;

Secondo GOST R 51592-2000 “Acqua. Requisiti generali al campionamento”, tutta l'acqua viene selezionata e consegnata al laboratorio microbiologico per le analisi;

Secondo GOST R 51593-2000 “Acqua potabile. Il campionamento” si applica solo all'acqua del rubinetto proveniente da sistemi di approvvigionamento idrico centralizzati;

In conformità con i requisiti delle norme e di altri documenti normativi per i metodi di determinazione;

Indicatori specifici e destinati a determinati tipi di acque.

Ad esempio, il campionamento dell'acqua dai sistemi centralizzati di approvvigionamento di acqua potabile viene effettuato secondo tre documenti normativi:

- GOST R 51593-2000 “Acqua potabile. Selezione del campione",
- MUK 4.2.1018-01 “Analisi sanitaria e microbiologica dell'acqua potabile”.

Le condizioni in cui vengono prelevati i campioni di acqua per la ricerca microbiologica dovrebbero essere prossime all'asettico, vale a dire non dimenticare di bruciare il rubinetto, scaricare l'acqua da questo rubinetto per 10 minuti e solo successivamente raccogliere l'acqua in un contenitore sterile. Il contenitore viene aperto immediatamente prima del prelievo rimuovendo il tappo insieme al cappuccio sterile. Durante il campionamento il tappo ed i bordi del contenitore non devono toccare nulla. Attualmente vengono utilizzate sacche monouso per il campionamento dell'acqua con e senza compressa di tiosolfato di sodio. Non risciacquare i piatti. Il campione viene prelevato direttamente dal rubinetto senza tubi di gomma, reti di distribuzione dell'acqua o altri accessori. Se c'è un flusso d'acqua costante attraverso il rubinetto di campionamento, il campionamento viene effettuato senza cottura preliminare, senza modificare la pressione dell'acqua e la struttura esistente (se sono presenti tubi in silicone o gomma).

I campioni di acqua provenienti da fonti di approvvigionamento idrico centralizzate e non centralizzate vengono prelevati in conformità con GOST R 51592-2000 “Acqua. Requisiti generali per il campionamento."

L'acqua della vasca della piscina viene selezionata in base ai seguenti documenti:

GOST R 51592-2000 “Acqua. Requisiti generali per il campionamento",
- SanPiN 2.1.2.1188-03 “Piscine. Requisiti igienici per la progettazione, il funzionamento e la qualità dell'acqua. Controllo di qualità".

I campioni d'acqua per l'analisi vengono prelevati in almeno 2 punti: uno strato superficiale di 0,5–1,0 cm di spessore e ad una profondità di 25–30 cm dalla superficie dell'acqua. Il monitoraggio della qualità dell'acqua nella vasca da bagno della piscina secondo gli indicatori microbiologici di base dovrebbe essere effettuato 2 volte al mese.

L'analisi dei campioni in laboratorio deve essere effettuata il più rapidamente possibile dal momento della raccolta. In assenza di raffreddamento, l'analisi viene eseguita entro e non oltre 2 ore dal campionamento e, quando raffreddato a 4-10°C, il periodo di conservazione del campione aumenta a 6 ore. Pertanto è necessario trasportare i campioni al laboratorio in contenitori termici (evitare il congelamento, poiché il congelamento di un campione uccide oltre il 99% dei batteri).

Poiché il numero di microrganismi nel campione può essere ridotto della metà in meno di 20 minuti grazie all'azione delle quantità residue di disinfettanti (cloro in pochi secondi), vengono utilizzati in un contenitore con tiosolfato di sodio (al ritmo di 10 mg per 500 ml di acqua) per neutralizzare l'acqua clorata e bromurata.

Il volume del campione viene determinato in base al numero di indicatori da determinare e al tipo di analisi in conformità con la ND per il metodo di determinazione degli indicatori. Ad esempio, il volume del campione quando si analizza l'acqua del rubinetto e dell'acqua di pozzo per i microrganismi indicatori è di 350 ml di acqua e per i microrganismi indicatori e la flora patogena - 1350 ml, il volume dei campioni di acqua della piscina è rispettivamente di 500 ml e 1500 ml.

SanPiN 2.1.4.1116-02 “Acqua potabile. Requisiti igienici per la qualità dell'acqua confezionata in contenitori. Controllo qualità", MU 2.1.4.1184-03" Linee guida sull'attuazione e l'applicazione delle norme e dei regolamenti sanitari ed epidemiologici SanPiN 2.1.4.1116-02 “Acqua potabile. Requisiti igienici per la qualità dell'acqua confezionata in contenitori. Controllo di qualità"

L'acqua potabile, confezionata in contenitori, viene prelevata in un volume di 2,5 litri, perché Solo la determinazione di Pseudomonas aeruginosa e colifagi richiede 1,0 litri di acqua.

Il campionamento del suolo viene effettuato in conformità con GOST 17.4.3.01-83 "Requisiti generali per il campionamento del suolo", GOST 17.4.4.02-84 "Metodi di campionamento e preparazione dei campioni per analisi chimiche, batteriologiche ed elmintologiche".

Un sito sperimentale è una parte dell'area di studio, caratterizzata da condizioni simili (topografia, uniformità della struttura del suolo e della copertura vegetale, natura dell'uso economico).

Il sito di prova dovrebbe essere situato in una posizione tipica dell'area di studio. Su una superficie di 100 m2 viene allestito un terreno di prova di 25 m2.

Campione puntuale - materiale prelevato da un punto dell'orizzonte o da uno strato del profilo del suolo, tipico per quell'orizzonte o strato.

I campioni puntuali vengono prelevati su un diagramma di campionamento da uno o più strati o orizzonti utilizzando il metodo dell'inviluppo. Scavare una fossa di 0,3 x 0,3 me profonda 0,2 m. La superficie di una delle pareti della fossa viene pulita con un coltello sterile. Quindi da questo muro viene ritagliato un campione di terreno, la cui dimensione è determinata dal campione fornito, quindi se è necessario selezionare 200 g di terreno, la dimensione del campione è 20 cm x 3 cm x 3 cm, 500 g - 20 cm x 5 cm x 3 cm.

I campioni puntuali vengono prelevati con un coltello, una spatola o una fresa per terreno.

Il campione raggruppato viene preparato mescolando campioni del punto prelevati da un'area di campionamento.

Per l'analisi batteriologica, vengono prelevati 10 campioni combinati da un sito di campionamento. Ogni campione combinato è composto da tre campioni puntiformi di peso compreso tra 200 e 250 g ciascuno, selezionati strato per strato da una profondità da 0 a 5 cm, da 5 a 20 cm.

Per evitare contaminazioni secondarie, i campioni di terreno destinati all'analisi batteriologica devono essere prelevati nel rispetto delle regole di asepsi: con strumenti sterili, miscelati su una superficie sterile, posti in un contenitore sterile. Il tempo che intercorre tra il campionamento e l'inizio dell'esame non deve superare 1 giorno.

Quando si monitora lo stato sanitario dei suoli nelle aree degli istituti per bambini e dei campi da gioco, il campionamento viene effettuato separatamente dai sabbiere e dal territorio generale da una profondità di 0 - 10 cm.

Da ogni sandbox viene prelevato un campione combinato, composto da 5 campioni di punti. Se necessario, è possibile prelevare un campione combinato da tutti i sandbox di ciascuno fascia di età, composto da campioni di 8-10 punti.

I campioni di terreno vengono prelevati dalle aree di gioco di ciascun gruppo (uno combinato di almeno cinque campioni), oppure un campione combinato da un territorio totale di 10 punti, e devono essere presi in considerazione i luoghi più probabili di contaminazione del suolo.

Quando si monitorano i suoli nell'area di fonti puntuali di inquinamento (pozzi neri, bidoni dei rifiuti, ecc.), gli appezzamenti campione di dimensioni non superiori a 5 x 5 m vengono posati a diverse distanze dalla fonte e in un luogo relativamente pulito (controllo ).

Quando si studia la contaminazione del suolo da parte delle autostrade di trasporto, i siti di prova vengono posati sui bordi stradali, tenendo conto del terreno, della copertura vegetale, delle condizioni meteorologiche e idrologiche.

I campioni di terreno vengono prelevati da strisce strette lunghe 200–500 m a una distanza di 0–10, 10–50, 50–100 m dalla superficie stradale. Un campione misto è composto da 20-25 campioni puntiformi prelevati da una profondità di 0-10 cm.

Quando si valutano i suoli nelle aree agricole, i campioni di terreno vengono prelevati 2 volte l'anno (primavera, autunno) da una profondità di 0-25 cm. Ogni 0-15 ettari viene realizzato almeno 1 appezzamento di 100-200 mq, a seconda del terreno e delle condizioni di utilizzo del territorio.

Per preparare un campione medio con un volume di 0,5 kg, il terreno di tutti i campioni di un'area viene versato su un foglio di carta spesso e sterile, mescolato accuratamente con una spatola sterile, le pietre e altri oggetti solidi vengono scartati. Quindi il terreno viene distribuito sul foglio in uno strato uniforme e sottile a forma di quadrato.

Il terreno viene diviso in 4 triangoli utilizzando le diagonali. Il terreno dei due triangoli opposti viene scartato e il resto viene nuovamente mescolato, distribuito nuovamente in uno strato sottile e diviso per diagonali fino a quando rimangono circa 0,5 kg di terreno.

Successivamente il campione viene consegnato al laboratorio con una direzione e un rapporto di raccolta del campione.

Approvato Risoluzione Comitato di Stato URSS secondo gli standard del 4 dicembre 1985 N 3810

Standard statale dell'URSS GOST 26669-85 (ST SEV 3014-81)

"PRODOTTI ALIMENTARI E AROMATICI. PREPARAZIONE DEI CAMPIONI PER ANALISI MICROBIOLOGICHE"

Alimenti e additivi alimentari. Preparazione dei campioni per analisi microbiologiche

Invece di GOST 10444.0-75

Questo standard si applica ai prodotti alimentari e aromatizzanti e specifica la preparazione dei campioni per le analisi microbiologiche.

I termini utilizzati nella norma e le relative spiegazioni sono specificati nell'Appendice 1.

1. Attrezzature, reagenti e materiali

1.1. Quando si preparano i campioni per l'analisi, vengono utilizzati le seguenti apparecchiature, reagenti e materiali:

bagnomaria;

omogeneizzatore, miscelatore da laboratorio o malta per porcellana secondo GOST 9147-80;

dispositivo di filtrazione a membrana;

bruciatore a gas o alcool secondo GOST 25336-82;

imbuti metallici;

punch;

chiave per l'apertura delle bottiglie;

apriscatole;

forbici, bisturi, pinzette secondo GOST 21241-89, spatola, cucchiaio;

stencil (modello);

provette secondo GOST 25336-82;

boccette secondo GOST 25336-82;

pipette secondo GOST 20292-74;

tappi di gomma;

perle di vetro;

alcool etilico rettificato secondo GOST 5962-67; 70%;

buste di plastica;

detergente;

cloruro di sodio secondo GOST 4233-77;

peptone per scopi batteriologici secondo GOST 13805-76.

Gli strumenti e la superficie dei dispositivi a diretto contatto con il prodotto devono essere sterilizzati utilizzando uno dei metodi specificati in GOST 26668-85.

1.2. Preparazione della soluzione peptone-salina

La soluzione peptone-salina viene preparata come segue; 8,5 g di cloruro di sodio e 1,0 g di peptone vengono sciolti in 1 dm 3 di acqua distillata con riscaldamento lento. La soluzione risultante, se necessario, viene filtrata su filtro di carta, portata a pH 7,0±0,1, versata in matracci, provette o altri contenitori, sigillati e sterilizzati ad una temperatura di (121±1)°C per 30 minuti.

La soluzione viene conservata in un luogo buio a una temperatura di (4±2)°C per non più di 30 giorni in condizioni che impediscano l'evaporazione dell'umidità.

La temperatura della soluzione peptone-salina deve corrispondere alla temperatura del prodotto da analizzare.

1.3. Preparazione dell'acqua peptonica

L'acqua peptonica viene preparata in modo simile ad una soluzione salina peptone senza l'aggiunta di cloruro di sodio.

2. Preparazione dei campioni per l'analisi

2.1. L'imballaggio del campione viene ispezionato e viene accertato che corrisponde alla dicitura sulla stampa litografica o sull'etichetta specificata nel documento di accompagnamento.

2.2. La confezione del campione viene pulita dalla contaminazione. Se si ricevono campioni di prodotto sigillati ermeticamente per l'analisi, verificare la tenuta del contenitore. La tenuta del cibo in scatola è determinata secondo GOST 8756.18-70, la tenuta dei contenitori polimerici con un prodotto, così come il cibo in scatola sigillato con coperchi con una membrana elastica (pulsante) - visivamente. La superficie della membrana elastica dovrebbe essere concava verso l'interno. I contenitori ermetici in vetro, metallo o polimero contenenti il ​​prodotto vengono lavati con acqua e detergente, quindi risciacquati con acqua pulita ed asciugati. La confezione non sigillata con il prodotto viene pulita con un tampone inumidito con alcool etilico.

Il cibo in scatola viene termostatato immediatamente prima dell'analisi microbiologica.

Sono soggetti a termostatazione i seguenti alimenti in scatola:

ermeticamente sigillato, apparentemente privo di difetti, destinato a determinare la sterilità industriale di un prodotto in scatola e la stabilità microbiologica del cibo in scatola;

con estremità vibranti e cracker in contenitori ermeticamente chiusi, atti ad individuare le cause di tali difetti.

Gli alimenti in scatola progettati per rilevare le tossine botuliniche al loro interno, bombardati, con segni di deterioramento microbiologico e non chiusi ermeticamente, non sono soggetti a termostatazione.

Per dimostrare l'attività vitale dei microrganismi aerobici mesofili, anaerobici facoltativi e anaerobici, il cibo in scatola viene termostatato a 30 - 37 ° C in contenitori con una capacità fino a 1 dm 3 compreso per almeno 5 giorni, in contenitori con una capacità di più di 1 dm 3 - per almeno 7 giorni.

Per dimostrare l'attività vitale dei microrganismi aerobi termofili, anaerobi facoltativi e anaerobici, il cibo in scatola in contenitori di qualsiasi capacità viene termostatato a 55 - 62°C per almeno 3 giorni. Durante la termostatazione il cibo in scatola viene ispezionato quotidianamente. I prodotti in scatola con difetti del contenitore che compaiono, immediatamente dopo la loro rilevazione, vengono rimossi dal termostato e conservati per 24 ore a temperatura ambiente, dopodiché si rileva lo stato del contenitore e, se possibile, l'aspetto del prodotto. Gli alimenti in scatola conservati in contenitori che assumono un aspetto normale dopo il raffreddamento a temperatura ambiente sono considerati esenti da difetti e la termostatazione continua.

Dopo aver termostatato il cibo in scatola e averlo raffreddato a temperatura ambiente per 24 ore, annotare lo stato del contenitore e, se possibile, l'aspetto del prodotto.

I difetti del cibo in scatola sono riportati nell'Appendice 2.

2.3. L'analisi microbiologica dei campioni di prodotto dall'aspetto normale viene effettuata in una scatola in condizioni asettiche. La confezione di un campione di un prodotto dall'aspetto sospetto o avariato viene aperta in un locale separato.

La preparazione della scatola è descritta nell'Appendice 3.

2.2, 2.3. (Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.4. I campioni con prodotto congelato vengono scongelati a una temperatura di (4±2)°C prima di preparare il campione. Il campione viene prelevato immediatamente dopo lo scongelamento, ma non oltre 18 ore dall'inizio dello scongelamento.

È consentito scongelare un campione di prodotto ad una temperatura di 18 - 20°C per 1 ora.

Campioni di prodotto di consistenza omogenea possono essere scongelati in termostato a 35°C, a condizione che lo scongelamento completo venga raggiunto in non più di 15 minuti.

2.5. Apertura della confezione con un campione del prodotto

2.5.1. Immediatamente prima di aprire la confezione con un campione del prodotto in un contenitore di consumo, sfuso o in fase liquida, mescolare ruotando il contenitore 10 volte dal basso verso il coperchio o con un movimento circolare.

2.5.2. La confezione con un campione del prodotto (ad eccezione del cibo in scatola) viene pulita con un tampone imbevuto di alcool etilico al 70%, l'alcol viene bruciato o rimosso mediante evaporazione libera. Quindi la confezione viene aperta, il collo è in metallo o barattoli di vetro bruciare e selezionare la massa (volume) del prodotto nella quantità necessaria per preparare uno o più campioni.

2.5.3. La confezione con il campione (sacchetti in pellicola, materiali polimerici o carta) viene aperta in un luogo precedentemente trattato con un tampone imbevuto di alcool. L'apertura della confezione contenente il campione del prodotto è effettuata in modo tale da escludere la possibilità di contaminazione del prodotto, degli oggetti circostanti e dell'ambiente.

2.5.4. Prima dell'apertura, la superficie del cibo in scatola dall'aspetto normale viene trattata con alcol etilico in uno dei seguenti modi:

Per i vasi in vetro viene trattato il coperchio; per i vasi in metallo viene lavorata l'estremità opposta a quella marcata.

La superficie del coperchio viene pulita con un batuffolo di cotone imbevuto di alcol, il tampone viene lasciato sulla superficie e illuminato prima di aprire il cibo in scatola;

vengono trattati anche tappi e coperchi a corona in gomma, bekelite e chiusure in plastica, ma il tampone non si accende;

Il cappuccio metallico (estremità), a seconda dello scopo dell'analisi, viene aperto o forato con un punzone 1 - 4 volte nelle immediate vicinanze del tampone in fiamme. La dimensione del foro (diametro o lunghezza) deve essere compresa tra 1 e 3 cm.

Campioni selezionati del prodotto vengono immediatamente seminati in terreni nutritivi o trasferiti in una soluzione salina di peptone per preparare una diluizione;

Prima di aprire flaconi o tubi con tappo a vite, svitare il tappo o bouchon trattato. I bordi della bottiglia o della membrana del tubo vengono bruciati nella fiamma di un bruciatore; la membrana viene forata con un bisturi sterile.

Prima di aprire una bottiglia sigillata con una corona o un tappo di alluminio, l'otturatore viene cotto nella fiamma di un bruciatore, il tappo viene rimosso con una chiave sterile e i bordi della bottiglia vengono nuovamente bruciati nella fiamma di un bruciatore.

Quando si aprono bottiglie con chiusura in gomma, la chiusura trattata con alcol etilico viene rimossa senza cottura preliminare e i bordi della bottiglia vengono bruciati con la fiamma di un bruciatore.

2.5.5. Il cibo in scatola dall'aspetto difettoso viene posto su un vassoio di metallo. Immediatamente prima di selezionare un campione del prodotto, la superficie del coperchio (estremità) viene trattata come specificato al punto 2.5.2, ma l'alcol etilico non viene dato alle fiamme. Il coperchio (o l'estremità) trattato viene coperto con un imbuto metallico sterile rovesciato in modo che l'imbuto copra completamente la superficie. Attraverso la stretta apertura dell'imbuto, forare con attenzione il coperchio (estremità) con un punzone sterile, formando un foro per l'ago.

Invece di un imbuto di metallo, è possibile utilizzare un sacchetto di plastica. Dopo aver lavorato il coperchio (estremità), il cibo in scatola viene posto in un sacchetto di plastica precedentemente pulito con alcool etilico in modo che il fondo del sacchetto copra la superficie da aprire. Il fondo della borsa è legato strettamente. Con attenzione, esercitando una leggera pressione con il perforatore, praticare un foro contemporaneamente nel coperchio del barattolo e nel sacchetto di plastica premuto saldamente su di esso.

Dopo che il gas e il prodotto hanno smesso di fuoriuscire dal barattolo con il prodotto, si rimuovono l'imbuto e il sacchetto, si pulisce nuovamente il coperchio con un tampone sterile, si allarga il foro con un punzone e si preleva immediatamente un campione del prodotto dal contenitore. vaso per la semina o per prepararne le diluizioni,

2.6. Selezione dei campioni e preparazione della diluizione iniziale

2.6.1. Da ciascun campione di prodotto, a seconda degli indicatori da determinare, vengono selezionati uno o più campioni per la preparazione di diluizioni e/o la semina in terreni nutritivi.

2.6.2. Il peso (volume) di un campione destinato alla semina in terreni nutritivi e/o alla preparazione delle sue diluizioni deve essere stabilito nella documentazione normativa e tecnica per un tipo specifico di prodotto o metodo di analisi.

2.6.3. Il campione per la semina viene selezionato in base al peso o al metodo volumetrico immediatamente dopo l'apertura del campione del prodotto. L'apertura viene effettuata in condizioni che escludono la contaminazione del prodotto da parte di microrganismi, in prossimità della fiamma del bruciatore utilizzando strumenti sterili.

2.6.4. Un campione del prodotto viene selezionato in modo che contenga tutti i suoi componenti e nello stesso rapporto del campione analizzato.

2.6.5. Per preparare le diluizioni di una porzione pesata del prodotto si utilizza una soluzione peptone-salina.

È consentito preparare diluizioni iniziali di prodotti con una frazione di massa di NaCl superiore al 5% utilizzando acqua peptone e diluizioni iniziali di carne, pesce e latticini utilizzando soluzione salina.

La massa (volume) di un campione del prodotto destinato alla preparazione della diluizione iniziale o dell'omogeneizzato deve essere almeno (10±0,1) g/cm 3 .

Il rapporto tra la massa (volume) di un campione del prodotto e il volume della soluzione peptone-salina per la diluizione iniziale e quelle successive è:

1:9 - per diluizione 10 volte (per prodotti contenenti grandi quantità di grassi senza tensioattivi 1:10);

Se è necessario diluire un campione di prodotti contenenti una grande quantità di grassi, è consentito l'uso di tensioattivi (bicarbonato di sodio, ecc.) che non possiedono attività antimicrobica.

Per preparare una diluizione di un campione di prodotti ad alta pressione osmotica è consentito utilizzare peptone o acqua distillata.

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.6.6. La diluizione iniziale di un campione del prodotto viene preparata nel rispetto delle condizioni asettiche utilizzando uno dei seguenti metodi:

prodotti di dissoluzione;

diluire prodotti che hanno una fase liquida;

sospensione di polveri, prodotti pastosi e superficie di pezzi di prodotto contaminati microbicamente;

omogeneizzazione di prodotti solidi.

2.6.7. I campioni di prodotti liquidi e viscosi vengono prelevati con una pipetta sterile con tappo in cotone inserendo la pipetta nella profondità del prodotto.

La porzione di prodotto rimasta sulla superficie della pipetta può fluire verso la punta della pipetta. La goccia risultante viene rimossa toccando la parete interna del piatto o del contenitore di consumo sopra la superficie del prodotto.

I prodotti viscosi vengono rimossi dalla superficie della pipetta con un tampone sterile.

Una parte pesata del prodotto viene trasferita in un contenitore con una soluzione peptone-salina per preparare la diluizione iniziale in modo che la pipetta non tocchi la superficie della soluzione peptone-salina. Utilizzando un'altra pipetta sterile, miscelare accuratamente il prodotto con la soluzione peptone-salina riempiendo ed espellendo la miscela per dieci volte.

Quando si lavora con prodotti viscosi è consigliabile miscelarli velocemente con la soluzione peptone-salina ponendo in un contenitore alcune sfere di vetro.

2.6.8. Prodotto liquido, saturo diossido di carbonio(CO 2), trasferire in una beuta conica sterile chiusa con un tappo di cotone o in un altro contenitore e riscaldare mescolando frequentemente con movimenti circolari a bagnomaria a una temperatura compresa tra 30 e 37 ° C finché non cessano di fuoriuscire bolle di gas Esso.

Una parte del campione del prodotto viene prelevata ed elaborata secondo la clausola 2.6.7.

2.6.9. Un campione di prodotti in polvere o sfusi viene prelevato con un cucchiaio o una spatola sterile da diversi punti del prodotto (se necessario, prima del campionamento, vengono rimossi 2 cm dello strato superiore del prodotto con un cucchiaio sterile), quindi il campione viene trasferito in un contenitore sterile prepesato con coperchio e pesato. Al campione viene aggiunta una soluzione salina di peptone nella quantità necessaria per preparare la diluizione iniziale. La miscela viene mescolata o agitata 25 volte con movimenti circolari con un raggio di 30 cm fino ad ottenere una consistenza omogenea del prodotto.

Se il prodotto in polvere non è solubile in acqua, dopo averlo miscelato con la soluzione peptone-salina, la sospensione risultante viene lasciata per 10 minuti e nuovamente agitata energicamente per 1 minuto.

2.6.10. Viene prelevato un campione di prodotti rigonfianti e viene preparata una prima diluizione in conformità con i requisiti della documentazione normativa e tecnica per uno specifico tipo di prodotto.

2.6.11. Un campione di prodotti solidi solubili in acqua viene prelevato con una spatola o un cucchiaio, dopo aver frantumato, macinato o macinato in condizioni asettiche e quindi trattato secondo la clausola 2.6.9.

Una porzione pesata di campioni di prodotti solidi insolubili in acqua viene omogeneizzata nei casi specificati nella documentazione normativa e tecnica. Quando si omogeneizza un prodotto, il numero totale di giri dell'omogeneizzatore dovrebbe essere compreso tra 15 e 20 mila. Il numero di giri dell'omogeneizzatore non deve essere inferiore a 8000 e superiore a 45000 giri al minuto.

Se durante l'omogeneizzazione del prodotto si ottiene una massa eterogenea, questa viene lasciata sedimentare per 15 minuti e il surnatante viene utilizzato per la semina e (o) la preparazione di diluizioni.

È consentito omogeneizzare un prodotto non sterilizzato macinandolo fino ad ottenere una consistenza omogenea in un mortaio sterile nel rispetto delle condizioni asettiche.

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.6.12. Un campione di prodotti pastosi viene prelevato dopo averli accuratamente mescolati con un cucchiaio o una bacchetta di vetro e quindi lavorato secondo la clausola 2.6.9.

2.6.13. Un campione di grassi liquidi viene prelevato con una pipetta calda riscaldata mediante flambé. Dopo aver riempito la pipetta con il prodotto, il prodotto rimanente viene rimosso dalla superficie della pipetta con un tampone sterile.

Il prodotto della pipetta viene posto in un contenitore con tappo di vetro smerigliato e diluito con la quantità necessaria di soluzione peptone-salina riscaldata a 40 - 45°C; quando si identificano microrganismi psicrofili, la temperatura non deve superare i 37°C. Eventuali residui di grasso attaccati alla pipetta vengono risciacquati con una soluzione salina di peptone, che viene aspirata dentro e fuori dalla pipetta più volte.

2.6.14. Il prelievo dei grassi solidi viene effettuato dopo aver tagliato il prodotto in più parti con un coltello o un filo. Se necessario, rimuovere lo strato superiore.

Un campione del prodotto viene prelevato dalla superficie delle sezioni in punti diversi con un bisturi e trasferito in un contenitore pesato con coperchio.

Una certa massa del campione viene trasferita in un contenitore a collo largo con tappo di vetro smerigliato. Il grasso rimasto attaccato alle pareti della vaschetta viene risciacquato nella vaschetta stessa con una certa quantità di soluzione peptone-salina riscaldata a 40 - 45°C, che viene aggiunta alla vaschetta nella quantità necessaria ad ottenere la diluizione iniziale.

Dai grassi solidi, il campione può essere selezionato in volume. I grassi vengono sciolti in un recipiente a collo largo, a bagnomaria, ad una temperatura non superiore a 45°C; quando si identificano microrganismi psicrofili, la temperatura non deve superare i 37°C.

Dopo aver miscelato il grasso fuso, questo viene trasferito con una pipetta calda in un contenitore a collo largo con coperchio in vetro smerigliato contenente la quantità di soluzione peptone-salina necessaria per preparare la diluizione iniziale. La soluzione peptone-salina viene preriscaldata a 40 - 45°C; nell'identificazione di microrganismi psicrofili fino a 37°C.

2.6.15. Campioni di prodotti montati o di consistenza pastosa contenenti una grande quantità di grasso, dopo aver mescolato con una bacchetta di vetro, vengono prelevati con un cucchiaio in un contenitore pesato e viene aggiunta una soluzione peptone-salina riscaldata a 40 - 45 ° C nella quantità necessaria per preparare la diluizione iniziale.

2.6.16. La determinazione della contaminazione microbica della superficie dei campioni di prodotto viene effettuata mediante risciacquo con tamponi di cotone.

Un tampone di cotone sterile viene inumidito con una soluzione salina di peptone e con esso asciugato in diversi punti sulla superficie di vari pezzi del prodotto analizzato. con superficie totale 100 cm2.

La superficie da analizzare viene misurata utilizzando dime sterili con fori di dimensioni adeguate.

Il tampone viene posto in una provetta contenente 10 cm 3 di soluzione peptone-salina. Il contenuto della provetta viene accuratamente miscelato utilizzando una pipetta. La sospensione risultante è considerata la diluizione iniziale.

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.7. Preparazione di diluizioni decuplicate

2.7.1. La prima diluizione decuplicata del campione è quella iniziale; la diluizione iniziale viene preparata conformemente al paragrafo 2.6. Da esso si ottengono le successive diluizioni.

2.7.2. La successiva seconda diluizione viene preparata da una parte della diluizione originale e nove parti di soluzione salina di peptone mediante miscelazione in una provetta.

Se per miscelare la diluizione iniziale è stata utilizzata una pipetta, con la stessa pipetta aggiungere 1 cm 3 della diluizione originale in 9 cm 3 di soluzione peptone-salina, senza toccare la superficie della soluzione con la pipetta. La diluizione viene miscelata con un'altra pipetta aspirando e soffiando per dieci volte il contenuto della provetta.

2.7.3. La terza e le successive diluizioni vengono preparate in modo simile.

2.7.4. L'intervallo tra la preparazione delle porzioni pesate del prodotto, le loro diluizioni e la semina nei terreni nutritivi non deve superare i 30 minuti.

Allegato 1
Informazione

Il termine utilizzato nella norma e le sue spiegazioni

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

Appendice 2
Informazione

Difetti del cibo in scatola

Sono considerati difetti di un prodotto in scatola:

segni di sviluppo di microrganismi visibili ad occhio nudo: fermentazioni, muffe, muco, ecc.;

sedimento sul fondo del vaso o all'interfaccia tra la superficie del prodotto e il contenitore (“anello”);

torbidità della fase liquida;

coagulazione;

inacidire;

odore e (o) sapore estraneo non caratteristico del prodotto;

cambio di colore.

Sono considerati difetti estetici dei contenitori con i prodotti confezionati al loro interno: segni di perdita visibili ad occhio nudo: buchi, fessure, sbavature o tracce di fuoriuscita di prodotto dal barattolo;

barattoli con estremità vibranti;

cucitura di lattine progettata in modo errato (lingue, denti, sottosquadro, falsa cucitura, cucitura arrotolata);

ruggine, dopo la rimozione della quale rimangono i gusci;

deformazione del corpo, delle estremità o della cucitura longitudinale delle lattine sotto forma di spigoli vivi e "uccelli";

coperchi obliqui su barattoli di vetro, ondulazioni sottosquadro dei coperchi lungo il bordo arrotolato, anello di gomma sporgente (“anello”);

crepe o vetro scheggiato in corrispondenza della giuntura, inserimento incompleto dei coperchi rispetto al collo del vaso;

deformazione (rientranza) dei coperchi dei barattoli di vetro, che ha causato una violazione della giuntura di tenuta;

una membrana elastica convessa (pulsante) sul coperchio.

Appendice 3
Informazione

Preparazione alla boxe

Il cibo in scatola viene aperto in un ripostiglio, appositamente dotato di un apparecchio per l'analisi microbiologica. Non dovrebbero esserci superfici nella scatola che siano inaccessibili per la disinfezione a umido e dovrebbe essere escluso il movimento dell'aria causato da correnti d'aria. Pareti, pavimenti e soffitti devono essere rivestiti con materiale o verniciati con vernice resistente al trattamento umido con disinfettanti. Per sterilizzare l'aria, la scatola è dotata di lampade ultraviolette alla velocità di 1,5 - 2,5 W per 1 m 3.

Nella scatola deve essere presente solo il microbiologo che effettua l'analisi e, se necessario, un assistente.

La scatola deve avere un tavolo e uno sgabello. Non dovrebbero esserci elementi non necessari oltre a quelli richiesti per l'analisi del cibo in scatola.

Sul tavolo dovrebbero esserci:

lampada ad alcool o bruciatore a gas;

un barattolo con tappo smerigliato contenente alcol;

un barattolo con coperchio con tamponi di cotone sterili spessi pre-preparati di 3 x 3 cm o anelli di cotone;

vasetti con soluzione disinfettante (altezza strato 3 cm) per posizionare pipette o provette utilizzate dopo l'analisi;

un piccolo vassoio di metallo o smalto su cui vengono posti i vasetti da analizzare;

pipette o provette sterili con cui viene prelevato il campione.

L'attrezzatura ausiliaria deve essere conservata nel cassetto del tavolo: pinzette e un punzone. Il punzone dovrebbe avere la forma di una lancia con una sezione trasversale a forma di rombo con diagonali di 1 x 1,5 cm o con una sezione trasversale a forma di triangolo isoscele.

Quando si aprono un gran numero di lattine, utilizzare un perforatore montato su un treppiede. In questo caso l'apertura avviene premendo il punzone posto sul coperchio del barattolo mediante una leva.

Prima di aprire il barattolo, il punch viene fiammato nella fiamma del tampone.

La scatola viene lavata e disinfettata immediatamente prima dell'analisi (non prima di 24 ore prima dell'inizio) e dopo la sua conclusione. La disinfezione viene effettuata pulendo tutte le superfici con cloro o altri disinfettanti secondo le istruzioni appropriate per ciascun farmaco. 45 minuti prima dell'inizio del lavoro nella scatola, le lampade battericide vengono accese per (30±5) minuti.

Attualmente per le analisi microbiologiche vengono utilizzate cappe a flusso laminare (cabine protettive ad aria ultra pulita). Le scatole a flusso laminare sono prodotte dallo stabilimento di apparecchiature mediche "Laminar" di Uzhgorod, le scatole del marchio BPV 1200 sono prodotte in Ungheria, le scatole del marchio TVG-S II 1.11.1 sono prodotte da Babcock - BSH (Germania).

Appendici 2, 3. (Introdotto in aggiunta, emendamento n. 1).

7. Il periodo di validità è stato rimosso dal decreto della norma statale dell'URSS del 23 gennaio 1991 N 38

8. EDIZIONE (aprile 2010) con Emendamento n. 1, approvato nel settembre 1989 (IUS 12-89)


Questo standard si applica ai prodotti alimentari e aromatizzanti e specifica la preparazione dei campioni per le analisi microbiologiche.

I termini utilizzati nella norma e le relative spiegazioni sono specificati nell'Appendice 1.

1. ATTREZZATURE, REAGENTI E MATERIALI

1.1. Quando si preparano i campioni per l'analisi, vengono utilizzati le seguenti apparecchiature, reagenti e materiali:

bagnomaria;

omogeneizzatore, miscelatore da laboratorio o malta di porcellana secondo GOST 9147;

dispositivo di filtrazione a membrana;

bruciatore a gas o alcool secondo GOST 25336;

imbuti metallici;

punch;

chiave per l'apertura delle bottiglie;

apriscatole;

forbici, bisturi, pinzette secondo GOST 21241, spatola, cucchiaio;

stencil (modello);

provette secondo GOST 25336;

boccette secondo GOST 25336;

pipette secondo la documentazione tecnica;

tappi di gomma;

perle di vetro;

alcool etilico rettificato secondo GOST 5962*; 70%;
________________
* Nel territorio Federazione Russa GOST R 51652-2000 è valido.


buste di plastica;

detergente;

cloruro di sodio secondo GOST 4233;

peptone per scopi batteriologici secondo GOST 13805.

Gli strumenti e la superficie dei dispositivi a diretto contatto con il prodotto devono essere sterilizzati utilizzando uno dei metodi specificati in GOST 26668.

1.2. Preparazione della soluzione peptone-salina

La soluzione di sale peptone viene preparata come segue: 8,5 g di cloruro di sodio e 1,0 g di peptone vengono sciolti in 1 dm di acqua distillata con riscaldamento lento. La soluzione risultante, se necessario, viene filtrata su filtro di carta, il pH viene impostato a 7,0±0,1, versata in matracci, provette o altri contenitori, sigillati e sterilizzati ad una temperatura di (121±1) °C per 30 minuti .

La soluzione viene conservata in un luogo buio a una temperatura di (4±2) °C per non più di 30 giorni in condizioni che impediscano l'evaporazione dell'umidità.

La temperatura della soluzione peptone-salina deve corrispondere alla temperatura del prodotto da analizzare.

1.3. Preparazione dell'acqua peptonica

L'acqua peptonica viene preparata in modo simile ad una soluzione salina peptone senza l'aggiunta di cloruro di sodio.

2. PREPARAZIONE DEI CAMPIONI PER LE ANALISI

2.1. L'imballaggio del campione viene ispezionato e viene accertato che corrisponde alla dicitura sulla stampa litografica o sull'etichetta specificata nel documento di accompagnamento.

2.2. La confezione del campione viene pulita dalla contaminazione. Se si ricevono campioni di prodotto sigillati ermeticamente per l'analisi, verificare la tenuta del contenitore. La tenuta del cibo in scatola è determinata secondo GOST 8756.18, la tenuta dei contenitori polimerici con un prodotto, così come il cibo in scatola sigillato con coperchi con una membrana elastica (pulsante) - visivamente. La superficie della membrana elastica dovrebbe essere concava verso l'interno. I contenitori ermetici in vetro, metallo o polimero contenenti il ​​prodotto vengono lavati con acqua e detergente, quindi risciacquati con acqua pulita ed asciugati. La confezione non sigillata con il prodotto viene pulita con un tampone inumidito con alcool etilico.

Il cibo in scatola viene termostatato immediatamente prima dell'analisi microbiologica.

Sono soggetti a termostatazione i seguenti alimenti in scatola:

ermeticamente sigillato, apparentemente privo di difetti, destinato a determinare la sterilità industriale di un prodotto in scatola e la stabilità microbiologica del cibo in scatola;

con estremità vibranti e cracker in contenitori ermeticamente chiusi, atti ad individuare le cause di tali difetti.

Gli alimenti in scatola progettati per rilevare le tossine botuliniche al loro interno, bombardati, con segni di deterioramento microbiologico e non chiusi ermeticamente, non sono soggetti a termostatazione.

Per dimostrare l'attività vitale dei microrganismi aerobi mesofili, anaerobici facoltativi e anaerobici, il cibo in scatola viene termostatato a 30-37 ° C in contenitori con capacità fino a 1 dm compreso per almeno 5 giorni, in contenitori con capacità superiore a 1 dm - per almeno 7 giorni.

Per dimostrare l'attività vitale dei microrganismi aerobi termofili, anaerobi facoltativi e anaerobici, il cibo in scatola in contenitori di qualsiasi capacità viene termostatato a 55-62 °C per almeno 3 giorni. Durante la termostatazione il cibo in scatola viene ispezionato quotidianamente. I prodotti in scatola con difetti del contenitore che compaiono, immediatamente dopo la loro rilevazione, vengono rimossi dal termostato e conservati per 24 ore a temperatura ambiente, dopodiché si rileva lo stato del contenitore e, se possibile, l'aspetto del prodotto. Gli alimenti in scatola conservati in contenitori che assumono un aspetto normale dopo il raffreddamento a temperatura ambiente sono considerati esenti da difetti e la termostatazione continua.

Dopo aver termostatato il cibo in scatola e averlo raffreddato a temperatura ambiente per 24 ore, annotare lo stato del contenitore e, se possibile, l'aspetto del prodotto.

I difetti del cibo in scatola sono riportati nell'Appendice 2.

2.3. L'analisi microbiologica dei campioni di prodotto dall'aspetto normale viene effettuata in una scatola in condizioni asettiche. La confezione di un campione di un prodotto dall'aspetto sospetto o avariato viene aperta in un locale separato.

La preparazione della scatola è descritta nell'Appendice 3.

2.2, 2.3. (Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.4. I campioni con prodotto congelato vengono scongelati a una temperatura di (4±2) °C prima di preparare il campione. Il campione viene prelevato immediatamente dopo lo scongelamento, ma non oltre 18 ore dall'inizio dello scongelamento.

È consentito scongelare un campione di prodotto ad una temperatura di 18-20 °C per 1 ora.

Campioni di prodotto di consistenza omogenea possono essere scongelati in un termostato a 35 °C, a condizione che lo scongelamento completo venga raggiunto in non più di 15 minuti.

2.5. Apertura della confezione con un campione del prodotto

2.5.1. Immediatamente prima di aprire la confezione con un campione del prodotto in un contenitore di consumo, sfuso o in fase liquida, mescolare ruotando il contenitore 10 volte dal basso verso il coperchio o con un movimento circolare.

2.5.2. La confezione con un campione del prodotto (ad eccezione del cibo in scatola) viene pulita con un tampone imbevuto di alcool etilico al 70%, l'alcol viene bruciato o rimosso mediante evaporazione libera. Successivamente si apre la confezione, si cuoce il collo dei barattoli di metallo o di vetro e si preleva la massa (volume) del prodotto nella quantità necessaria per preparare una o più porzioni.

2.5.3. La confezione con il campione (sacchetti in pellicola, materiali polimerici o carta) viene aperta in un luogo precedentemente trattato con un tampone imbevuto di alcool. L'apertura della confezione contenente il campione del prodotto è effettuata in modo tale da escludere la possibilità di contaminazione del prodotto, degli oggetti circostanti e dell'ambiente.

2.5.4. Prima dell'apertura, la superficie del cibo in scatola dall'aspetto normale viene trattata con alcol etilico in uno dei seguenti modi:

Per i vasi in vetro viene trattato il coperchio; per i vasi in metallo viene lavorata l'estremità opposta a quella marcata.

La superficie del coperchio viene pulita con un batuffolo di cotone imbevuto di alcol, il tampone viene lasciato sulla superficie e illuminato prima di aprire il cibo in scatola;

vengono trattati anche tappi e coperchi a corona in gomma, bekelite e chiusure in plastica, ma il tampone non si accende;

Il cappuccio metallico (estremità), a seconda dello scopo dell'analisi, viene aperto o forato con un punzone 1-4 volte nelle immediate vicinanze del tampone in fiamme. La dimensione del foro (diametro o lunghezza) dovrebbe essere 1-3 cm.

Campioni selezionati del prodotto vengono immediatamente seminati in terreni nutritivi o trasferiti in una soluzione salina di peptone per preparare una diluizione;

Prima di aprire flaconi o tubi con tappo a vite, svitare il tappo o bouchon trattato. I bordi della bottiglia o della membrana del tubo vengono bruciati nella fiamma di un bruciatore; la membrana viene forata con un bisturi sterile.

Prima di aprire una bottiglia sigillata con una corona o un tappo di alluminio, l'otturatore viene cotto nella fiamma di un bruciatore, il tappo viene rimosso con una chiave sterile e i bordi della bottiglia vengono nuovamente bruciati nella fiamma di un bruciatore.

Quando si aprono bottiglie con chiusura in gomma, la chiusura trattata con alcol etilico viene rimossa senza cottura preliminare e i bordi della bottiglia vengono bruciati con la fiamma di un bruciatore.

2.5.5. Il cibo in scatola dall'aspetto difettoso viene posto su un vassoio di metallo. Immediatamente prima della selezione di un campione del prodotto, la superficie del coperchio (estremità) viene trattata come specificato al paragrafo 2.5.2, ma l'alcol etilico non viene dato alle fiamme. Il coperchio (o l'estremità) trattato viene coperto con un imbuto metallico sterile rovesciato in modo che l'imbuto copra completamente la superficie. Attraverso la stretta apertura dell'imbuto, forare con attenzione il coperchio (estremità) con un punzone sterile, formando un foro per l'ago.

Invece di un imbuto di metallo, è possibile utilizzare un sacchetto di plastica. Dopo aver lavorato il coperchio (estremità), il cibo in scatola viene posto in un sacchetto di plastica precedentemente pulito con alcool etilico in modo che il fondo del sacchetto copra la superficie da aprire. Il fondo della borsa è legato strettamente. Con attenzione, esercitando una leggera pressione con il perforatore, praticare un foro contemporaneamente nel coperchio del barattolo e nel sacchetto di plastica premuto saldamente su di esso.

Dopo che il gas e il prodotto hanno smesso di fuoriuscire dal barattolo con il prodotto, si rimuovono l'imbuto e il sacchetto, si pulisce nuovamente il coperchio con un tampone sterile, si allarga il foro con un punzone e si preleva immediatamente un campione del prodotto dal contenitore. vaso per la semina o per prepararne le diluizioni.

2.6. Selezione dei campioni e preparazione della diluizione iniziale

2.6.1. Da ciascun campione di prodotto, a seconda degli indicatori da determinare, vengono selezionati uno o più campioni per la preparazione di diluizioni e/o la semina in terreni nutritivi.

2.6.2. Il peso (volume) di un campione destinato alla semina in terreni nutritivi e/o alla preparazione delle sue diluizioni deve essere stabilito nella documentazione normativa e tecnica per un tipo specifico di prodotto o metodo di analisi.

2.6.3. Il campione per la semina viene selezionato in base al peso o al metodo volumetrico immediatamente dopo l'apertura del campione del prodotto. L'apertura viene effettuata in condizioni che escludono la contaminazione del prodotto da parte di microrganismi, in prossimità della fiamma del bruciatore utilizzando strumenti sterili.

2.6.4. Un campione del prodotto viene selezionato in modo che contenga tutti i suoi componenti e nello stesso rapporto del campione analizzato.

2.6.5. Per preparare le diluizioni di una porzione pesata del prodotto si utilizza una soluzione peptone-salina.

È consentito preparare diluizioni iniziali di prodotti con una frazione di massa di NaCl superiore al 5% utilizzando acqua peptone e diluizioni iniziali di carne, pesce e latticini utilizzando soluzione salina.

La massa (volume) di un campione del prodotto destinato alla preparazione della diluizione iniziale o dell'omogeneizzato deve essere almeno (10±0,1) g/cm.

Il rapporto tra la massa (volume) di un campione del prodotto e il volume della soluzione peptone-salina per la diluizione iniziale e quelle successive è:

1:9 - per diluizione 10 volte (per prodotti contenenti grandi quantità di grassi senza tensioattivi 1:10);

1:5 - per diluizione 6 volte;

1:3 - per diluizione 4 volte;

1:1 - per diluizione doppia.

Se è necessario diluire un campione di prodotti contenenti una grande quantità di grassi, è consentito l'uso di tensioattivi (bicarbonato di sodio, ecc.) che non possiedono attività antimicrobica.

Per preparare una diluizione di un campione di prodotti ad alta pressione osmotica è consentito utilizzare peptone o acqua distillata.

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.6.6. La diluizione iniziale di un campione del prodotto viene preparata nel rispetto delle condizioni asettiche utilizzando uno dei seguenti metodi:

prodotti di dissoluzione;

diluire prodotti che hanno una fase liquida;

sospensione di polveri, prodotti pastosi e superficie di pezzi di prodotto contaminati microbicamente;

omogeneizzazione di prodotti solidi.

2.6.7. I campioni di prodotti liquidi e viscosi vengono prelevati con una pipetta sterile con tappo in cotone inserendo la pipetta nella profondità del prodotto.

La porzione di prodotto rimasta sulla superficie della pipetta può fluire verso la punta della pipetta. La goccia risultante viene rimossa toccando la parete interna del piatto o del contenitore di consumo sopra la superficie del prodotto.

I prodotti viscosi vengono rimossi dalla superficie della pipetta con un tampone sterile.

Una parte pesata del prodotto viene trasferita in un contenitore con una soluzione peptone-salina per preparare la diluizione iniziale in modo che la pipetta non tocchi la superficie della soluzione peptone-salina. Utilizzando un'altra pipetta sterile, miscelare accuratamente il prodotto con la soluzione peptone-salina riempiendo ed espellendo la miscela per dieci volte.

Quando si lavora con prodotti viscosi è consigliabile miscelarli velocemente con la soluzione peptone-salina ponendo in un contenitore alcune sfere di vetro.

2.6.8. Il prodotto liquido, saturo di anidride carbonica (CO), viene trasferito in un matraccio conico sterile sigillato con un tappo di cotone o altro contenitore e riscaldato con frequente agitazione con movimento circolare a bagnomaria a una temperatura compresa tra 30 e 37 ° C fino a quando da esso non esce più alcun gas.

Una parte del campione del prodotto viene prelevata ed elaborata secondo la clausola 2.6.7.

2.6.9. Un campione di prodotti in polvere o sfusi viene prelevato con un cucchiaio o una spatola sterile da diversi punti del prodotto (se necessario, prima del campionamento, vengono rimossi 2 cm dello strato superiore del prodotto con un cucchiaio sterile), quindi il campione viene trasferito in un contenitore sterile prepesato con coperchio e pesato. Al campione viene aggiunta una soluzione salina di peptone nella quantità necessaria per preparare la diluizione iniziale. La miscela viene mescolata o agitata 25 volte con movimenti circolari con un raggio di 30 cm fino ad ottenere una consistenza omogenea del prodotto.

Se il prodotto in polvere non è solubile in acqua, dopo averlo miscelato con la soluzione peptone-salina, la sospensione risultante viene lasciata per 10 minuti e nuovamente agitata energicamente per 1 minuto.

2.6.10. Viene prelevato un campione di prodotti rigonfianti e viene preparata una prima diluizione in conformità con i requisiti della documentazione normativa e tecnica per uno specifico tipo di prodotto.

2.6.11. Un campione di prodotti solidi solubili in acqua viene prelevato con una spatola o un cucchiaio, dopo aver frantumato, macinato o macinato in condizioni asettiche e quindi trattato secondo la clausola 2.6.9.

Una porzione pesata di campioni di prodotti solidi insolubili in acqua viene omogeneizzata nei casi specificati nella documentazione normativa e tecnica. Quando si omogeneizza un prodotto, il numero totale di giri dell'omogeneizzatore dovrebbe essere 15-20 mila. Il numero di giri dell'omogeneizzatore non dovrebbe essere inferiore a 8000 e superiore a 45000 giri al minuto.

Se durante l'omogeneizzazione del prodotto si ottiene una massa eterogenea, questa viene lasciata sedimentare per 15 minuti e il surnatante viene utilizzato per la semina e (o) la preparazione di diluizioni.

È consentito omogeneizzare un prodotto non sterilizzato macinandolo fino ad ottenere una consistenza omogenea in un mortaio sterile nel rispetto delle condizioni asettiche.

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.6.12. Un campione di prodotti pastosi viene prelevato dopo averli accuratamente mescolati con un cucchiaio o una bacchetta di vetro e quindi lavorato secondo la clausola 2.6.9.

2.6.13. Un campione di grassi liquidi viene prelevato con una pipetta calda riscaldata mediante flambé. Dopo aver riempito la pipetta con il prodotto, il prodotto rimanente viene rimosso dalla superficie della pipetta con un tampone sterile.

Il prodotto della pipetta viene posto in un contenitore con tappo di vetro smerigliato e diluito con la quantità necessaria di soluzione peptone-salina riscaldata a 40-45 °C; quando si identificano microrganismi psicrofili, la temperatura non deve superare i 37 °C. Eventuali residui di grasso attaccati alla pipetta vengono risciacquati con una soluzione salina di peptone, che viene aspirata dentro e fuori dalla pipetta più volte.

2.6.14. Il prelievo dei grassi solidi viene effettuato dopo aver tagliato il prodotto in più parti con un coltello o un filo. Se necessario, rimuovere lo strato superiore.

Un campione del prodotto viene prelevato dalla superficie delle sezioni in punti diversi con un bisturi e trasferito in un contenitore pesato con coperchio.

Una certa massa del campione viene trasferita in un contenitore a collo largo con tappo di vetro smerigliato. Il grasso rimasto attaccato alle pareti della vaschetta viene risciacquato nella stessa vaschetta con una certa quantità di soluzione salina-peptone riscaldata a 40-45 °C, che viene aggiunta alla vaschetta nella quantità necessaria ad ottenere la diluizione iniziale.

Dai grassi solidi, il campione può essere selezionato in volume. I grassi vengono sciolti in un recipiente a collo largo, a bagnomaria, ad una temperatura non superiore a 45 °C; quando si identificano microrganismi psicrofili, la temperatura non deve superare i 37 °C.

Dopo aver miscelato il grasso fuso, questo viene trasferito con una pipetta calda in un contenitore a collo largo con coperchio in vetro smerigliato contenente la quantità di soluzione peptone-salina necessaria per preparare la diluizione iniziale. La soluzione peptone-salina viene preriscaldata a 40-45 °C; quando si identificano microrganismi psicrofili fino a 37 °C.

2.6.15. Campioni di prodotti montati o di consistenza pastosa contenenti una grande quantità di grasso, dopo aver mescolato con una bacchetta di vetro, vengono prelevati con un cucchiaio in un contenitore pesato e viene aggiunta una soluzione peptone-salina riscaldata a 40-45°C nella quantità necessaria preparare la diluizione iniziale.

2.6.16. La determinazione della contaminazione microbica della superficie dei campioni di prodotto viene effettuata mediante risciacquo con tamponi di cotone.

Un tampone di cotone sterile viene inumidito con una soluzione salina di peptone e con esso asciugato in diversi punti sulla superficie di vari pezzi del prodotto analizzato con un'area totale di 100 cm.

La superficie da analizzare viene misurata utilizzando dime sterili con fori di dimensioni adeguate.

Il tampone viene posto in una provetta contenente 10 ml di soluzione salina di peptone. Il contenuto della provetta viene accuratamente miscelato utilizzando una pipetta. La sospensione risultante è considerata la diluizione iniziale.

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

2.7. Preparazione di diluizioni decuplicate

2.7.1. La prima diluizione decuplicata del campione è quella iniziale; la diluizione iniziale viene preparata conformemente al paragrafo 2.6. Da esso si ottengono le successive diluizioni.

2.7.2. La successiva seconda diluizione viene preparata da una parte della diluizione originale e nove parti di soluzione salina di peptone mediante miscelazione in una provetta.

Se per miscelare la diluizione iniziale è stata utilizzata una pipetta, con la stessa pipetta aggiungere 1 cm della diluizione iniziale in 9 cm di soluzione peptone-salina, senza toccare la superficie della soluzione con la pipetta. La diluizione viene miscelata con un'altra pipetta aspirando e soffiando per dieci volte il contenuto della provetta.

2.7.3. La terza e le successive diluizioni vengono preparate in modo simile.

2.7.4. L'intervallo tra la preparazione delle porzioni pesate del prodotto, le loro diluizioni e la semina nei terreni nutritivi non deve superare i 30 minuti.

APPENDICE 1 (per riferimento). Il termine utilizzato nella norma e le sue spiegazioni

ALLEGATO 1
Informazione

(Edizione modificata, emendamento n. 1).

APPENDICE 2 (per riferimento). DIFETTI DELLE CONSERVAZIONI IN SCATOLA

APPENDICE 2
Informazione

Sono considerati difetti di un prodotto in scatola:

segni di sviluppo di microrganismi visibili ad occhio nudo: fermentazioni, muffe, muco, ecc.;

sedimento sul fondo del vaso o all'interfaccia tra la superficie del prodotto e il contenitore (“anello”);

torbidità della fase liquida;

coagulazione;

inacidire;

odore e (o) sapore estraneo non caratteristico del prodotto;

cambio di colore.

Sono considerati difetti estetici i contenitori con i prodotti confezionati al loro interno:

segni di fuoriuscita visibili ad occhio nudo: buchi, fessure, sbavature o tracce di fuoriuscita di prodotto dal barattolo;

bombardamento;

petardi;

barattoli con estremità vibranti;

cucitura di lattine progettata in modo errato (lingue, denti, sottosquadro, falsa cucitura, cucitura arrotolata);

ruggine, dopo la rimozione della quale rimangono i gusci;

deformazione del corpo, delle estremità o della cucitura longitudinale delle lattine sotto forma di spigoli vivi e "uccelli";

coperchi inclinati su barattoli di vetro, ondulazioni sottosquadro dei coperchi lungo il bordo arrotolato, anello di gomma sporgente (“anello”);

crepe o vetro scheggiato in corrispondenza della giuntura, inserimento incompleto dei coperchi rispetto al collo del vaso;

deformazione (rientranza) dei coperchi dei barattoli di vetro, che ha causato una violazione della giuntura di tenuta;

una membrana elastica convessa (pulsante) sul coperchio.

APPENDICE 3 (per riferimento). PREPARAZIONE DELLA BOXE

APPENDICE 3
Informazione

Il cibo in scatola viene aperto in un ripostiglio appositamente adattato per l'analisi microbiologica. Non dovrebbero esserci superfici nella scatola che siano inaccessibili per la disinfezione a umido e dovrebbe essere escluso il movimento dell'aria causato da correnti d'aria. Pareti, pavimenti e soffitti devono essere rivestiti con materiale o verniciati con vernice resistente al trattamento umido con disinfettanti. Per sterilizzare l'aria, la scatola è dotata di lampade ultraviolette alla velocità di 1,5-2,5 W per 1 m.

Nella scatola deve essere presente solo il microbiologo che effettua l'analisi e, se necessario, un assistente.

La scatola deve avere un tavolo e uno sgabello. Non dovrebbero esserci elementi non necessari oltre a quelli richiesti per l'analisi del cibo in scatola.

Sul tavolo dovrebbero esserci:

lampada ad alcool o bruciatore a gas;

un barattolo con tappo smerigliato contenente alcol;

un barattolo con coperchio con tamponi di cotone sterili densi pre-preparati di 3x3 cm o anelli di cotone;

vasetti con soluzione disinfettante (altezza strato 3 cm) per posizionare pipette o provette utilizzate dopo l'analisi;

un piccolo vassoio di metallo o smalto su cui vengono posti i vasetti da analizzare;

pipette o provette sterili con cui viene prelevato il campione.

L'attrezzatura ausiliaria deve essere conservata nel cassetto del tavolo: pinzette e un punzone. Il punzone dovrebbe avere la forma di una lancia con una sezione trasversale a forma di rombo con diagonali di 1x1,5 cm o con una sezione trasversale a forma di triangolo isoscele.

Quando si aprono un gran numero di lattine, utilizzare un perforatore montato su un treppiede. In questo caso l'apertura avviene premendo il punzone posto sul coperchio del barattolo mediante una leva.

Prima di aprire il barattolo, il punch viene fiammato nella fiamma del tampone.

La scatola viene lavata e disinfettata immediatamente prima dell'analisi (non prima di 24 ore prima dell'inizio) e dopo la sua conclusione. La disinfezione viene effettuata pulendo tutte le superfici con cloro o altri disinfettanti secondo le istruzioni appropriate per ciascun farmaco. 45 minuti prima dell'inizio del lavoro nella scatola, le lampade battericide vengono accese per (30±5) minuti.

Attualmente per le analisi microbiologiche vengono utilizzate cappe a flusso laminare (cabine protettive ad aria ultra pulita). Le scatole a flusso laminare sono prodotte dallo stabilimento di apparecchiature mediche "Laminar" di Uzhgorod, le scatole del marchio BPV 1200 sono prodotte in Ungheria, le scatole del marchio TVG-S II 1.14.1 sono prodotte da Babcock - BSH (Germania).


APPENDICI 2, 3. (Introdotto in aggiunta l'emendamento n. 1).

Testo del documento elettronico
preparato da Kodeks JSC e verificato rispetto a:
pubblicazione ufficiale
Prodotti alimentari, cibo in scatola.
Metodi di analisi microbiologica:

Sab. GOST. - M.: Standardinform, 2010

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METODI DI CONTROLLO MICROBIOLOGICO DEL SUOLO - RACCOMANDAZIONI METODOLOGICHE (approvate dal Capo Sanitario dello Stato della Federazione Russa... Rilevante nel 2018

4. Campionamento per analisi batteriologiche

Il controllo dell'inquinamento del suolo nelle aree popolate viene effettuato tenendo conto delle zone funzionali della città. I luoghi di campionamento vengono preliminarmente contrassegnati su una mappa che riflette la struttura del paesaggio urbano. Il campionamento viene effettuato in conformità con GOST 17.4.4.01-83 "Requisiti generali per il campionamento del suolo"; GOST 17.4.4.02-84 "Metodi di campionamento e preparazione di campioni per analisi chimiche, batteriologiche, elmintologiche". Viene redatta una descrizione del territorio da monitorare, indicando l'indirizzo, il punto di campionamento, la topografia generale del microdistretto, l'ubicazione dei siti di campionamento e le fonti di inquinamento, la copertura vegetale, la natura dell'uso del suolo, il livello delle acque sotterranee, il tipo di suolo e altri dati necessari per la corretta valutazione e interpretazione dei campioni dei risultati dei test.

I campionamenti per le analisi batteriologiche vengono effettuati almeno una volta all'anno nei luoghi dove possono essere presenti persone e animali, e nei luoghi dove è presente contaminazione con rifiuti organici. Quando si studia la dinamica dell'autodepurazione del suolo, il campionamento viene effettuato settimanalmente durante il primo mese, e poi mensilmente durante la stagione vegetativa fino al completamento della fase attiva di autodepurazione.

Un sito sperimentale è una parte dell'area di studio, caratterizzata da condizioni simili (rilievo, uniformità della struttura del suolo e della copertura vegetale, natura dell'uso economico).

Il sito di prova dovrebbe essere situato in una posizione tipica dell'area di studio. Su una superficie di 100 mq. m, viene posato un sito di prova di 25 m. Se il rilievo è eterogeneo, i siti vengono selezionati in base agli elementi del rilievo.

Campione puntuale - materiale prelevato da un punto dell'orizzonte o da uno strato del profilo del suolo, tipico per quell'orizzonte o strato.

I campioni puntuali vengono prelevati su un diagramma di campionamento da uno o più strati o orizzonti utilizzando il metodo dell'inviluppo. Viene scavata una fossa di 0,3 m x 0,3 me profonda 0,2 m. La superficie di una delle pareti della fossa viene pulita con un coltello sterile. Quindi da questo muro viene ritagliato un campione di terreno, la cui dimensione è determinata dal campione fornito, quindi se è necessario selezionare 200 g di terreno, la dimensione del campione è 20 cm x 3 cm x 3 cm, 500 g - 20x5x3 cm.

I campioni puntuali vengono prelevati con un coltello, una spatola o una fresa per terreno.

Il campione raggruppato viene preparato mescolando campioni del punto prelevati da un'area di campionamento.

Per l'analisi batteriologica, vengono prelevati 10 campioni combinati da un sito di campionamento. Ogni campione combinato è composto da tre campioni puntiformi di peso compreso tra 200 e 250 g ciascuno, selezionati strato per strato da una profondità da 0 a 5 cm, da 5 cm a 20 cm.

Al fine di prevenire la contaminazione secondaria, i campioni di terreno destinati all'analisi batteriologica devono essere prelevati nel rispetto delle norme asettiche: prelevati con strumenti sterili, miscelati su una superficie sterile, posti in un contenitore sterile. Il tempo che intercorre tra il campionamento e l'inizio dell'esame non deve superare 1 giorno.

Quando si studiano gli effetti dei pesticidi, ecc. sostanze chimiche per i processi di microflora e autodepurazione negli strati più profondi del terreno viene utilizzata una fossa profonda fino a 1 m per il prelievo di campioni di terreno dalla parete della fossa con uno strumento sterile ogni 10 cm.

Per monitorare le condizioni igieniche dei suoli negli istituti prescolari, scolastici e medici, nei parchi giochi e nelle aree ricreative, il campionamento viene effettuato almeno 2 volte l'anno, in primavera e in autunno. La dimensione dell'area di prova non deve essere superiore a 5 x 5 m.

Quando si monitora lo stato sanitario dei suoli nelle aree degli istituti per bambini e dei campi da gioco, il campionamento viene effettuato separatamente dai sabbiere e dal territorio generale da una profondità di 0 - 10 cm.

Da ogni sandbox viene prelevato un campione combinato, composto da 5 campioni di punti. Se necessario, è possibile prelevare un campione combinato da tutte le sandbox di ciascuna fascia di età, composto da campioni da 8 - 10 punti.

I campioni di terreno vengono prelevati dalle aree di gioco di ciascun gruppo (uno combinato di almeno cinque campioni), oppure un campione combinato da un territorio totale di 10 punti, e devono essere presi in considerazione i luoghi più probabili di contaminazione del suolo.

Quando si monitorano i suoli nell'area di fonti puntuali di inquinamento (pozzi neri, bidoni dei rifiuti, ecc.), gli appezzamenti campione di dimensioni non superiori a 5 x 5 m vengono posati a diverse distanze dalla fonte e in un luogo relativamente pulito (controllo ).

Quando si studia la contaminazione del suolo da parte delle autostrade di trasporto, i siti di prova vengono posati sui bordi stradali, tenendo conto del terreno, della copertura vegetale, delle condizioni meteorologiche e idrologiche.

I campioni di terreno vengono prelevati da strisce strette lunghe 200 - 500 m ad una distanza di 0 - 10, 10 - 50, 50 - 100 m dalla superficie stradale. Un campione misto è composto da 20 - 25 campioni puntiformi prelevati da una profondità di 0 - 10 cm.

Nella valutazione dei suoli delle aree agricole vengono prelevati campioni di terreno 2 volte all'anno (primavera, autunno) da una profondità di 0 - 25 cm. Per ogni 0 - 15 ettari viene posato almeno 1 sito di 100 - 200 metri quadrati. m a seconda del terreno e delle condizioni di utilizzo del territorio.

Nelle grandi città con numerose fonti di inquinamento, la mappatura geochimica viene effettuata utilizzando una rete di test. Per identificare i focolai di contaminazione, si consiglia una densità di campionamento compresa tra 1 e 5 campioni per 1 metro quadrato. km con una distanza tra i punti di campionamento di 400 - 1000 m Per identificare ulteriormente il territorio con il massimo grado di contaminazione, la rete di test è condensata a 25 - 30 campioni per 1 quadrato. km con una distanza tra i punti di campionamento di circa 200 m. I campioni vengono prelevati da una profondità di 0 - 5 cm.

I campioni prelevati devono essere numerati e registrati su un giornale, indicando i seguenti dati: numero di matricola e luogo del campionamento, terreno, tipologia del suolo, destinazione dell'area, tipo di inquinamento, data del campionamento.

I campioni devono essere muniti di etichetta indicante il luogo e la data del campionamento, il numero della sezione del terreno, la differenza del suolo, l'orizzonte e la profondità del campionamento, nonché il nome del ricercatore.

Campionamento per analisi microbiologiche

Prima del campionamento, l'aspetto delle unità di imballaggio viene determinato visivamente.

I campioni dei prodotti per le analisi microbiologiche vengono prelevati prima del campionamento per le analisi fisico-chimiche e organolettiche.

I campioni di prodotto per le analisi microbiologiche vengono prelevati in contenitori sterili, il cui collo viene prima bruciato nella fiamma del bruciatore. I campioni vengono raccolti utilizzando strumenti sterili.

Ogni bottiglia contenente il campione è provvista di un'etichetta che deve indicare: il nome del produttore, il nome della birra, la data di imbottigliamento, la data del campionamento, la quantità di birra da cui è stato prelevato il campione, i nomi e posizioni delle persone che hanno prelevato il campione.

Prima dell'analisi, le bottiglie dei campioni devono essere conservate a una temperatura compresa tra 0 e 5 °C per non più di 24 ore.

Preparazione dei campioni per analisi microbiologiche

L'imballaggio del campione viene ispezionato e viene accertato che corrisponde all'iscrizione sulla stampa litografica o sull'etichetta specificata nel documento di accompagnamento.

La confezione del campione viene pulita dalla contaminazione. Se si ricevono campioni di prodotto sigillati ermeticamente per l'analisi, verificare la tenuta del contenitore.

L'analisi microbiologica dei campioni di prodotto dall'aspetto normale viene effettuata in una scatola in condizioni asettiche.

Prima di prelevare un campione della bevanda finita, il tappo e il collo della bottiglia affiorano lattina di metallo o altro imballaggio viene pulito con un batuffolo di cotone imbevuto di una soluzione al 70% di alcol etilico. Quindi, utilizzando una chiave sterile, rimuovere rapidamente il tappo della radice o svitare il tappo della bottiglia. Il collo di una bottiglia aperta viene bruciato nella fiamma di una lampada ad alcool o pulito con una soluzione al 70% di alcol etilico e viene prelevato il volume della bevanda richiesto per l'analisi. (30712)

Semina con il metodo del filtro a membrana

100 ml di birra da ciascuna confezione vengono fatti passare attraverso un filtro a membrana con un diametro dei pori di 0,45 nm. I filtri vengono lavati con acqua distillata sterile per rimuovere i residui di birra, tagliati in 2 metà, ciascuna metà viene posta su una capsula Petri del diametro di 5 cm, precedentemente riempita con terreno di wort agar o agar birra universale. Una metà del filtro viene posta in condizioni anaerobiche per 11 giorni ad una temperatura di 25°C, l'altra metà in condizioni aerobiche per 3 giorni ad una temperatura di 25°C. Le colonie coltivate sono suddivise in batteri, lieviti e muffe . I batteri vengono sottoposti al test della catalasi per isolare lattobacilli e pediococchi. I risultati ottenuti su ciascuna metà del filtro vengono moltiplicati per due per ottenere una quantità totale di 100 ml.

Determinazione del numero di microrganismi aerobi mesofili e anaerobi facoltativi

Il metodo si basa sulla semina del prodotto in un mezzo nutritivo agar, sull'incubazione delle colture e sul conteggio di tutte le colonie visibili coltivate.

Quando si determina il numero di microrganismi mediante semina in mezzi nutritivi di agar, 1 cm 3 del prodotto viene seminato in due piastre Petri parallele. I raccolti vengono versati con un mezzo nutritivo fuso e raffreddati a 45-48 0 C.

Le colture vengono incubate ad una temperatura di (30±1) O C per (72±3) ore. Le piastre Petri con le colture vengono distribuite in un termostato in modo che la distanza tra le pile di piastre e le pareti del termostato sia di almeno 3 ore. cm.

Su ciascuna capsula Petri si conta il numero di colonie cresciute, posizionandola capovolta su fondo scuro, utilizzando una lente di ingrandimento con un ingrandimento di 4-10 volte. Ogni colonia contata viene contrassegnata con inchiostro sul fondo del piatto. Per il conteggio vengono selezionate piastre sulle quali sono cresciute da 15 a 300 colonie.

Se il numero di colonie è elevato e la loro distribuzione uniforme, dividere il fondo della piastra Petri in 4 o più settori identici, contare puramente le colonie in 2-3 settori (ma non meno di 13 della superficie della piastra), trovare la media aritmetica del numero di colonie e moltiplicarla per il numero totale di settori delle coppe intere. Pertanto, viene trovato il numero totale di colonie nelle colture di una diluizione.

Il numero di microrganismi presenti in 1,0 g (cm 3) di prodotto M si calcola utilizzando la formula: M=NхmЧC, dove N è il grado di diluizione del campione; m è la quantità di inoculo aggiunta alla capsula Petri, cm 3; C è la media aritmetica arrotondata del numero di colonie.

Il numero di microrganismi aerobi mesofili e anaerobi facoltativi (KMAFAnM) è espresso come CFU/cm 3 o CFU/g, dove CFU è un'unità formante colonie.