Perché viene eseguita la coltura batterica per la microflora patogena e come decifrare i dati. Coltura per flora e sensibilità agli antibiotici - indicazioni, preparazione, raccolta del materiale e interpretazione Coltura per microflora con determinazione della sensibilità

È noto che i microrganismi, nonostante la loro “piccola crescita”, hanno anche “predilezioni” alimentari, una temperatura ottimale, in generale, un ambiente ideale per loro, dove si sentono a proprio agio e bene, e quindi iniziano a moltiplicarsi e a crescere intensamente. .

La semina batteriologica o, come viene comunemente chiamata in breve, semina in vasca, viene utilizzata per ottenere un gran numero di microbi di un tipo (coltura pura) per studiarne le proprietà fisico-chimiche e biologiche, in modo che successivamente utilizzare i dati ottenuti per diagnosticare malattie infettive.

Sfortunatamente, anche i metodi attualmente popolari e altri, il cui principale svantaggio sono risultati falsi positivi o falsi negativi, non sono sempre in grado di identificare l'agente patogeno. Inoltre, non sono in grado di selezionare farmaci antibatterici mirati. Un problema simile è risolto dalla vasca di semina, che spesso non ha fretta di prescrivere, citando il fatto che, ad esempio, viene coltivata lentamente e il costo dell'analisi è considerevole. Tuttavia, la salute vale la pena!

Sono necessarie le condizioni per la nutrizione e la respirazione

I microbiologi ora sanno che ogni agente patogeno ha bisogno del proprio ambiente “nativo”, tenendo conto del suo pH, dei potenziali redox, della viscosità, dell’umidità e delle proprietà osmotiche. I supporti possono essere morbidi e duri, semplici e complessi, universali e poco universali, ma in tutti i casi devono garantire nutrimento, respirazione, riproduzione e crescita della cellula batterica.

un esempio della crescita di microrganismi dopo la semina in vasca in un mezzo nutritivo

Alcuni terreni (tioglicolato, Sabouraud) sono adatti per un'ampia gamma di microrganismi e sono chiamati universali. Altri sono destinati solo ad alcune specie, ad esempio il pneumococco e lo Staphylococcus aureus, che producono emolisina, crescono su agar sangue, che serve per isolare ceppi particolarmente “capricciosi” e, allo stesso tempo, pericolosi. Pertanto, esistono molti tipi di terreni, in ognuno dei quali cresce la propria gamma di microrganismi.

Lo scopo della coltivazione dei microrganismi e il suo significato per la diagnosi

Oltre all'acqua, all'aria, al suolo, che contengono vari microrganismi in concentrazioni variabili, compresi quelli che portano malattie (patogeni), molti rami della scienza medica sono interessati ai microbi che vivono sulla pelle e sulle mucose corpo umano, che può essere rappresentato:

• Abitanti permanenti che non rappresentano alcun pericolo per l'uomo, cioè la normale microflora del corpo, senza la quale semplicemente non possiamo vivere. Ad esempio, la scomparsa dei batteri che vivono nell'intestino e partecipano al processo di digestione porta alla disbiosi, che non è facile da trattare. La stessa cosa accade con la scomparsa della microflora vaginale. Si popola subito di microrganismi opportunisti, gardnerella, ad esempio, che causano;
• Flora patogena opportunistica, che è dannoso solo in grandi quantità in determinate condizioni (immunodeficienza). La suddetta gardnerella è un rappresentante di questo tipo di microrganismo;
• Presenza di microbi patogeni, che non sono presenti in un corpo sano. Sono estranei al corpo umano, dove entrano accidentalmente attraverso il contatto con un'altra persona (malata) e provocano lo sviluppo di un processo infettivo, a volte piuttosto grave o addirittura fatale. Ad esempio, un incontro con agenti patogeni: qualunque cosa accada, all'inizio viene trattato, ma (Dio non voglia!) rilascerà colera, peste, vaiolo, ecc.

Fortunatamente molti di loro sono stati sconfitti e attualmente sono tenuti sotto sigillo in appositi laboratori, ma l'umanità dovrà essere preparata in ogni momento all'invasione di un nemico invisibile capace di distruggere intere nazioni. La coltura batteriologica in questi casi gioca, forse, il ruolo principale nell'identificazione del microrganismo, cioè nel determinare il genere, la specie, il tipo, ecc. (posizione tossiconomica), che è molto importante per la diagnosi dei processi infettivi, comprese le malattie sessualmente trasmissibili.

Pertanto, i metodi di semina, come i terreni nutritivi, sono diversi, ma hanno lo stesso obiettivo: ottenere una cultura pura senza impurità estranee sotto forma di microbi di altre classi, che vivono ovunque: nell'acqua, nell'aria, sulle superfici, sopra e dentro gli esseri umani.

Quando viene prescritta la semina in vasca e come comprendere le risposte?

Nome del microrganismo e sua quantità

I pazienti non si prescrivono analisi batteriologiche; questa viene eseguita dal medico se sospetta che i problemi di un paziente che presenta vari disturbi siano associati alla penetrazione di un agente patogeno nell'organismo o all'aumento della riproduzione di microrganismi che vivono costantemente con una persona, ma mostrano proprietà patogene solo in determinate condizioni. Dopo aver superato il test e dopo aver ricevuto una risposta dopo un po ', una persona si perde e talvolta si spaventa quando vede parole e simboli incomprensibili, quindi, per evitare che ciò accada, vorrei dare una breve spiegazione su questo tema:

Quando si esamina il materiale biologico per la presenza di microrganismi patogeni, la risposta può essere negativa o positiva ("cattiva coltura dell'acquario"), poiché per loro il corpo umano è solo un rifugio temporaneo e non un habitat naturale.

A volte, a seconda del materiale da inoculare, è possibile vedere il numero di microrganismi espressi in unità formanti colonie per ml (una cellula vivente farà crescere un'intera colonia) - CFU/ml. Ad esempio, una coltura di urina per esame batteriologico in condizioni normali fornisce fino a 10 3 CFU/ml di tutte le cellule batteriche identificate, in casi dubbi (ripetere l'analisi!) - 10 3 - 10 4 CFU/ml, in caso di infiammazione processo di origine infettiva - 10 5 o superiore CFU /ml. Riguardo alle ultime due opzioni nel discorso colloquiale, a volte vengono semplicemente espresse: "Cattiva semina in vasca".

Come “trovare il controllo” contro un microrganismo patogeno?

Contemporaneamente all'inoculazione del materiale in tali situazioni, la microflora viene inoculata per la sensibilità agli antibiotici, che darà una risposta chiara al medico - quali farmaci antibatterici e in quali dosi “spaventeranno” l '“ospite non invitato”. C'è anche una decrittazione qui, ad esempio:

• Il tipo di microrganismo, ad esempio, è lo stesso E. coli nella quantità di 1x10^6;
• Il nome dell'antibiotico con la designazione (S) indica la sensibilità dell'agente patogeno a questo farmaco;
• Il tipo di antibiotici che non agiscono sul microrganismo è indicato dal simbolo (R).

L'analisi batteriologica è di particolare valore nel determinare la sensibilità agli antibiotici, poiché il problema principale nella lotta contro la clamidia, il micoplasma, l'ureaplasma, ecc. rimane la scelta di un trattamento efficace che non danneggi l'organismo e non influisca sulle tasche del paziente.

Tabella: Esempio alternativo di risultati di colture in vasca che identificano antibiotici efficaci

Una corretta preparazione per l'analisi batteriologica è la chiave per ottenere risultati affidabili

Qualsiasi materiale biologico prelevato da una persona può essere sottoposto ad analisi batteriologica(pelle, sangue, sperma, mucose del cavo orale, tratto respiratorio e genito-urinario, tratto gastrointestinale, organi della vista, dell'udito e dell'olfatto, ecc.). Molto spesso, la coltura in vasca viene prescritta da ginecologi e urologi, quindi dovremmo soffermarci un po' su di essa.

La chiave per un risultato corretto sarà un'adeguata preparazione per la coltura batteriologica, altrimenti l'analisi dovrà essere ripetuta e attendere il tempo stabilito. Come donare il sangue da una vena per sterilità è compito degli operatori sanitari. Di norma, qui nulla dipende dal paziente; egli provvede semplicemente a piegare il gomito e l'infermiera preleva il campione in una provetta sterile rispettando tutte le regole di asepsi e antisepsi.

Un'altra cosa è l'urina o dal tratto genitale. Qui il paziente deve assicurare la prima fase (raccolta), seguendo le regole prescritte. Va notato che l'urina delle donne e degli uomini è leggermente diversa, sebbene in vescia in entrambi i sessi è sterile:

• Nella donna, nel passaggio attraverso l'uretra può catturare un piccolo numero di cocchi non patogeni, anche se in genere rimane spesso sterile;
• Per gli uomini le cose sono un po’ diverse. La parte anteriore dell'uretra può fornire l'urina che passa con:
  1. difteroidi;
  2. stafilococchi;
  3. alcuni batteri gram-negativi non patogeni, come verrà successivamente evidenziato dalle analisi batteriologiche.

Tuttavia, se sono in una concentrazione accettabile (fino a 10 3 CFU/ml), non c'è nulla di cui aver paura, questa è una variante della norma.

Per evitare la presenza di altri microrganismi e garantire la massima sterilità del materiale prelevato, prima dell'analisi, gli organi genitali vengono accuratamente puliti (l'ingresso della vagina nelle donne è chiuso con un batuffolo di cotone - protezione dall'ingresso di secrezioni genitali) . Per l'analisi viene prelevata una porzione media di urina (l'inizio della minzione nella toilette, porzione media di circa 10 ml in un barattolo sterile, finendo nella toilette). I pazienti devono sapere: l'urina prelevata per la coltura deve essere analizzata entro e non oltre due ore se conservata a una temperatura non superiore a 20°C, quindi è necessario calcolare il tempo di trasporto.

Inoltre, il materiale per la vasca di coltura, se necessario, viene prelevato dall'uretra e dal retto negli uomini, dall'uretra, dal retto, dalla vagina, dalla cervice e dal canale cervicale nelle donne, ma ciò avviene nell'istituto medico dove deve arrivare il paziente. In questi casi è vietato lavare, lavare e usare antisettici.

Altre questioni che preoccupano i pazienti

Molti pazienti sono interessati a quanti giorni viene eseguita l'analisi. A questa domanda non è possibile rispondere in modo inequivocabile, tutto dipende da quale materiale si sta studiando e da quale agente patogeno si dovrebbe cercare. A volte la risposta è pronta in 3 giorni, a volte in una settimana o addirittura in 10-14 giorni, poiché alcuni campioni richiedono la subcoltura su un altro terreno.

Le persone che si recano alla semina in vasca non ignorano la questione del prezzo dell'analisi. Il costo approssimativo a Mosca è di circa 800 – 1500 rubli. Naturalmente può essere più elevato e dipende dall'ampiezza dello spettro della ricerca batteriologica. Probabilmente puoi fare un test gratuito durante la gravidanza in una clinica prenatale o in una clinica per motivi medici speciali.

Per le donne incinte, la semina in vasca è obbligatoria e viene somministrata 2 volte(al momento della registrazione e alla 36a settimana), in questo caso viene prelevato uno striscio non solo dal tratto genitale, ma anche dalle mucose del naso e della faringe. L'oggetto della ricerca in questo caso, oltre alle infezioni urogenitali, sarà lo Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), che nel periodo postpartum può causare molti problemi (mastite purulenta, ecc.). Inoltre, le donne incinte devono sottoporsi a urinocoltura, raschiamento dell'epitelio vaginale e strisci della cervice e del canale cervicale.

Molte donne, prima di sottoporsi alla procedura, hanno molta paura di parole così terribili e iniziano a pensare: “È necessario? Forse non andrò”. Ci affrettiamo ad assicurarvi che i test sono assolutamente indolori. Viene prelevato uno striscio dalla cervice e dal canale cervicale con un citospazzola sterile, senza causare alcun dolore alla donna, ma successivamente la vasca di coltura di sh/m e c/c proteggerà e futura mamma e il feto da possibili complicazioni. Gli oggetti di ricerca durante la gravidanza sono gli agenti causali della clamidia, dell'urea e del micoplasma, dei lieviti (di solito Candida albicans) e di altri microrganismi opportunistici e patogeni.

Video: dimostrazione video sulla coltura in vasca dal canale cervicale

Casi particolari di particolare interesse per chi sostiene i test

Una volta che i microrganismi patogeni entrano nel tratto genitale, si insediano in brevissimo tempo e iniziano le loro attività dannose. Ad esempio, sempre i gonococchi patogeni (Neisseria), che sono i colpevoli di una malattia piuttosto spiacevole chiamata e correlata alle malattie sessualmente trasmissibili, si sentono letteralmente "a casa" il 3 ° giorno. Cominciano a riprodursi attivamente e si muovono coraggiosamente verso l'alto lungo il tratto riproduttivo, catturando sempre più nuovi territori. Tutti sanno che ormai la gonorrea si può curare bene e quasi nessuno ne ha più paura. Ma prima devi trovarla. Il metodo principale per ricercare questa infezione è la coltura, l'esame colturale, l'identificazione mediante colorazione di Gram e la microscopia.

I “chicchi di caffè” (diplococchi) trovati in coppia in uno striscio prelevato “per la flora” dal tratto genitale non indicano la presenza di una malattia a trasmissione sessuale. Tale microflora vaginale appare spesso in postmenopausa e non significa nulla di male. Uno striscio prelevato in condizioni non sterili su un vetrino e colorato con blu di metilene o Romanovsky (citologia) non è in grado di differenziare il microrganismo. Può solo fare un'ipotesi e indirizzare il paziente a ulteriori ricerche (ottenendo una coltura isolata).

Va notato che mentre i raschiamenti delle mucose del tratto genito-urinario prelevati per la coltura dell'ureaplasma non sono un evento così raro, i medici stessi spesso evitano l'urinocoltura, poiché è più difficile da lavorare.

Le difficoltà nella diagnosi vengono create portando grande danno non solo durante la gravidanza. Inoltre, la clamidia provoca molte malattie caratteristiche non solo delle donne, ma anche della popolazione maschile, quindi viene seminata, coltivata, studiata, viene determinata la sensibilità alla terapia antibatterica e, quindi, combattuta.

Durante la gravidanza, è generalmente difficile fare a meno della coltura batteriologica, poiché molti microrganismi, mascherati in uno striscio citologico, possono non essere rilevati. Nel frattempo, l’effetto di alcuni agenti patogeni delle malattie sessualmente trasmissibili sul feto può essere dannoso. Inoltre, curare una donna incinta è molto più difficile e prescrivere antibiotici "a occhio" è semplicemente inaccettabile.

Metodi di semina

Per isolare colture pure di agenti patogeni, la prima fase consiste nell'inocularle su terreni appropriati, operazione effettuata in condizioni speciali (sterili!). Fondamentalmente, il trasferimento del materiale nel mezzo viene effettuato utilizzando dispositivi utilizzati nel XIX secolo dal grande Louis Pasteur:

• Ciclo batterico;
• Pipetta Pasteur;
• Bacchetta di vetro.

Naturalmente, molti strumenti hanno subito modifiche nel corso di 2 secoli, sostituiti da quelli di plastica sterili e usa e getta, tuttavia quelli vecchi non sono rimasti nel passato, continuando a servire la scienza microbiologica fino ai giorni nostri.

La prima fase per ottenere colonie richiede il rispetto di alcune regole:

1. La semina viene effettuata su lampada ad alcool in cassetta pretrattata con disinfettanti e trattamento al quarzo, oppure in cappa a flusso laminare, garantendo la sterilità dell'area di lavoro;
2. Anche l'abbigliamento, i guanti e l'ambiente dell'operatore sanitario devono essere sterili, poiché il contrario interferisce con l'isolamento dei ceppi isolati;
3. Devi lavorare velocemente ma con attenzione nella scatola; non puoi parlare o essere distratto; allo stesso tempo devi ricordarti della sicurezza personale, perché il materiale può essere contagioso.

Isolamento di ceppi e studio di colture pure

L'isolamento dei ceppi non è sempre lo stesso, poiché alcuni mezzi biologici presenti nel corpo umano richiedono un approccio individuale, ad esempio, l'emocoltura (sangue) viene prima "cresciuta" in un mezzo liquido (rapporto 1: 10), poiché il sangue (non diluito) può uccidere i microrganismi e quindi, dopo un giorno o più, vengono trasferiti nelle piastre Petri.

Anche la semina dell'urina, delle acque di lavanda gastrica e di altri materiali liquidi ha le sue caratteristiche, dove per ottenere una coltura pura, il liquido deve prima essere centrifugato (condizioni asettiche!), e solo dopo seminato, non il liquido stesso, ma il suo sedimento .

La coltivazione e la crescita delle colonie viene effettuata su piastre Petri o poste prima in un mezzo liquido versato in bottiglie sterili, quindi le colonie isolate vengono nuovamente seminate, ma su agar inclinato e il materiale viene posto in un termostato per un giorno. Dopo essersi assicurati che la coltura risultante sia pura, i ceppi vengono trasferiti su un vetrino, viene preparato uno striscio e colorato con Gram (il più delle volte), Ziehl-Neelsen, ecc., e per la differenziazione viene studiata la morfologia del microbo al microscopio:

• Dimensioni e forma della cellula batterica;
• Presenza di capsule, flagelli, spore;
• Proprietà tintoriali (rapporto tra microrganismo e colorazione)*.

*Il lettore ha probabilmente sentito parlare di un agente patogeno come il treponema pallidum? Questo è l'agente eziologico della sifilide, e il suo nome (pallido) è il motivo per cui sembra che non percepisca bene la vernice e rimanga leggermente rosato quando colorato secondo Romanovsky. I microrganismi che non accettano i coloranti all'anilina sono chiamati gram-negativi, mentre quelli che li percepiscono sono chiamati gram-positivi. I batteri Gram-negativi assumono un colore rosa o rosso quando colorati con Gram mediante coloranti aggiuntivi (fucsina, safranina).

La coltura in vasca può essere definita un'analisi antica, ma la sua popolarità non diminuisce per questo, sebbene la batteriologia moderna abbia la capacità di isolare non solo i ceppi, ma anche una cellula separata da essa, che si chiama clone. Tuttavia, per ottenere un clone è necessario un dispositivo speciale: un micromanipolatore, che non è disponibile nei normali laboratori, poiché viene utilizzato principalmente per scopi di ricerca (ricerca genetica).

Per ottenere un risultato affidabile, l'analisi deve essere effettuata almeno 2 settimane dopo l'ultima dose di antibiotici e (o) farmaci antibatterici.

• Raschiando da uretra Si consiglia di eseguire il test 2 ore dopo l'ultima minzione, a partire dal faringe e rinofaringe - a stomaco vuoto (4-5 ore dopo l'ultimo pasto, in questo caso è necessario escludere lavarsi i denti e sciacquarsi la bocca), per gli altri loci non è necessaria alcuna preparazione particolare.
• Urina. L'oggetto dello studio è una porzione media di urina rilasciata liberamente, nella quantità di 3-5 ml in un contenitore monouso di plastica sterile (il contenitore può essere ritirato alla reception) dopo un'accurata pulizia dei genitali esterni senza l'uso di antisettici . Il tempo di consegna in laboratorio a temperatura ambiente è di 1-2 ore, a temperatura 2-8°C – 5-6 ore.
• Sperma per la ricerca batteriologica viene raccolto in un contenitore monouso di plastica sterile a collo largo mediante masturbazione (il contenitore può essere ritirato alla reception). Il tempo di consegna del materiale al laboratorio a temperatura ambiente è di 1-2 ore.
• Espettorato Si consiglia di raccogliere al mattino, a stomaco vuoto dopo aver igienizzato il cavo orale, in un contenitore di plastica sterile. Il tempo di consegna del materiale al laboratorio a temperatura ambiente è di 1-2 ore, a temperatura 2-8°C - 5-6 ore.
• Recinzione secrezione della prostata eseguito da un urologo dopo il massaggio preliminare della prostata (questa manipolazione viene eseguita solo presso l'Ufficio Centrale). Prima del prelievo delle secrezioni prostatiche si consiglia l'astinenza sessuale per almeno 2 giorni.
• Ricerca batteriologica latte materno . Il latte materno viene raccolto solo prima dell'alimentazione del bambino o due ore dopo l'allattamento. Il paziente esaminato lava la ghiandola mammaria sinistra e destra acqua calda con sapone e salviette asciugate con un asciugamano pulito. Trattare la superficie dei capezzoli e dei polpastrelli con un batuffolo di cotone moderatamente inumidito con alcool etilico al 70%. La prima porzione di latte materno, circa 0,5 ml, viene scartata. Quindi, senza toccare il capezzolo con le mani, la donna spreme 0,5 - 1 ml di latte da ciascuna ghiandola in un contenitore sterile separato (i contenitori possono essere ritirati alla reception). Il tempo di consegna in laboratorio a temperatura ambiente è di 1-2 ore, a temperatura 2-8°C – 5-6 ore.
• Recinzione con liquido inoviale per l'esame batteriologico, viene effettuato da un medico in un contenitore di plastica sterile (il contenitore può essere ritirato alla reception). Questa procedura non viene eseguita in un ambiente di laboratorio. Il tempo di consegna del materiale al laboratorio a temperatura ambiente è di 1-2 ore, a temperatura 2-8°C - 5-6 ore.
• Recinzione secrezione della ferita per l'esame batteriologico viene effettuato da un medico, in un contenitore monouso con terreno di Ames (il contenitore può essere ritirato alla reception). Il tempo di consegna del materiale al laboratorio a temperatura ambiente è entro 6 ore, a una temperatura di 2-8°C - fino a 2 giorni.
• Bile per la ricerca batteriologica, viene raccolto durante il sondaggio, separatamente, nelle porzioni A, B e C in tre provette sterili, oppure durante l'intervento chirurgico utilizzando una siringa in una provetta, osservando le regole dell'asepsi (questa procedura non viene eseguita in laboratorio). Il tempo di consegna del materiale al laboratorio a temperatura ambiente è di 1-2 ore, a temperatura 2-8°C - 5-6 ore.

Uno striscio sulla flora è un test fondamentale e obbligatorio quando si visita un ginecologo. Questo metodo aiuta a identificare il processo infiammatorio nelle fasi iniziali, a differenziare il tipo di agente patogeno, a determinare il grado di pulizia vaginale e la presenza di disbiosi.

Il prelievo viene effettuato da un ginecologo dalla vagina, dalla cervice e dall'apertura uretrale esterna. I campioni risultanti vengono posti su un vetrino, essiccati e trasportati al laboratorio per ulteriori studi microbiologici.

Il contenuto informativo si basa sul fatto che diverse cellule e batteri sono dipinti in diversi colori. Questa caratteristica consente di condurre un'analisi qualitativa e quantitativa della composizione della flora e identificare deviazioni patologiche.

Utilizzando uno striscio, determinare:

• contenuto di eritrociti e leucociti nelle secrezioni;
• composizione qualitativa della microflora e grado di pulizia vaginale;
• agenti patogeni di malattie sessualmente trasmissibili (gonorrea, trichomonas, ureaplasma);

Una coltura in vasca per la flora e la sensibilità agli agenti antibatterici viene eseguita se si sospetta un processo infiammatorio negli organi pelvici e violazioni di grado 3-4 della pulizia vaginale.

La semina è un metodo colturale e si differenzia dallo striscio in quanto il materiale viene posto in un ambiente favorevole per potenziali agenti patogeni, seguito da uno studio sulla loro reazione agli agenti antimicrobici utilizzati.

Uno svantaggio significativo dello studio è la sua durata. A seconda dell'agente patogeno, la coltura della microflora e la determinazione della sensibilità agli antibiotici possono richiedere da 3-5 giorni a diverse settimane.

Ciò è associato all’elevata frequenza di prescrizione empirica di farmaci antibatterici, basata sulla selezione di agenti con lo spettro d’azione più ampio possibile, che colpiscono tutti i sospetti agenti patogeni.

Per diagnosticare rapidamente agenti patogeni specifici (malattie sessualmente trasmissibili), vengono utilizzati la reazione a catena della polimerasi (PCR) o il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA).

• rapporti sessuali e uso di metodi contraccettivi vaginali;
• lavande, somministrazione di creme vaginali e supposte.

Si consiglia di effettuare uno striscio almeno due settimane dopo la sospensione dei farmaci antibatterici a causa dell'alto rischio di risultati falsi negativi durante la terapia antimicrobica.

Il periodo delle mestruazioni e i due giorni successivi alla loro fine sono considerati controindicazioni per questo studio.

Caratteristiche della raccolta del materiale clinico

L'analisi microbiologica viene effettuata per confermare o escludere lesioni infiammatorie di natura infettiva, per determinare la composizione della microflora con l'identificazione di rappresentanti transitori (opportunistici), la loro relazione quantitativa con i batteri sani.

In condizioni normali, la mucosa dell'utero e delle tube è sterile a causa della secrezione del canale cervicale contenente lisozima, che ha un effetto antimicrobico.

La composizione del normale microbiota degli organi genitali femminili è relativamente stabile. Piccoli cambiamenti e differenze che non sono considerati patologie possono essere causati da:

• caratteristiche di età;
• gravidanza;
• cambiamenti ormonali.

Strisci vaginali

I campioni per la microscopia vengono raccolti dalla mucosa del fornice posteriore o da aree infiammatorie. Dopo l'inserimento dello speculum, le secrezioni vengono raccolte su un tampone di cotone sterile. Per studiare ulteriormente lo striscio colorato, la secrezione viene trasferita su un pezzo di vetro facendo rotolare il tampone sul vetro. Successivamente, lo striscio viene essiccato e fissato con etanolo.

Se è necessario condurre uno studio colturale (coltura di antibiotici dalla vagina per determinare la suscettibilità dei microrganismi patogeni a vari farmaci), il tampone deve essere immediatamente posto in un contenitore sterile e inviato al laboratorio.

Uretra

La raccolta dei campioni viene effettuata nel serbatoio. ansa, dopo aver pulito l'apertura esterna dell'uretra con garza sterile. L'anello viene inserito nell'uretra, non più profondo di due centimetri. Successivamente, per la microscopia e l'ELISA, il campione viene distribuito su un vetrino. Quando si esegue un'analisi colturale e una reazione a catena della polimerasi, il materiale viene posto in un contenitore contenente un mezzo speciale e consegnato al laboratorio.

Cervice

Il prelievo viene effettuato dopo aver aperto la cervice nello speculum e aver trattato attentamente la sua parte vaginale. soluzione. Il tampone deve essere inserito nel canale cervicale, facendo attenzione a non toccare le pareti vaginali.

Se è necessario eseguire un test colturale dal canale cervicale per la sensibilità agli antibiotici, il tampone viene posto in un mezzo speciale per un ulteriore trasporto e inviato al laboratorio.

Quando si raccoglie materiale per microscopia, ELISA, PCR e ricerca virologica, viene utilizzato uno speciale pennello per tampone per ottenere raschiamenti cellulari. La raccolta deve essere eseguita con estrema attenzione per non danneggiare la mucosa ed evitare che il sangue penetri sul tampone.

Contrariamente alla credenza popolare, la procedura non è controindicata per le donne incinte e non può causare aborti spontanei o danneggiare il feto.

Utero

Una speciale sonda viene inserita nell'utero attraverso il canale cervicale, con ulteriore aspirazione del contenuto patologico. È necessario il rigoroso rispetto delle regole di asepsi. La procedura non viene eseguita in presenza di malattie infiammatorie della cervice e della vagina, a causa del rischio di introdurre infezioni nella cavità uterina.

Inoltre è controindicato in gravidanza.

Appendici

Il materiale viene raccolto durante la puntura di formazioni tumorali o interventi chirurgici. Di norma, per la coltura vengono utilizzati pus ed essudato.

Genitali esterni

Il campione viene prelevato da aree infiammatorie. In caso di danno alle ghiandole di Bartolini (grandi ghiandole del vestibolo), viene eseguita una puntura, seguita dal prelievo di pus per la coltura.

Indicatori di microflora sana

La composizione della flora dipende direttamente da:

• età del paziente;
• livelli ormonali;
• la presenza di malattie infettive e infiammatorie;
• patologie di fondo;
• assunzione di farmaci che interrompono il sano equilibrio di microrganismi e batteri (farmaci antibatterici, uso a lungo termine di farmaci antinfiammatori antifungini e non steroidei, citostatici, ormoni).

La microbiocenosi vaginale in un bambino inizia a formarsi dopo la nascita a causa dei lattobacilli ottenuti durante il parto dalla madre (lattobacilli anaerobici-bacillo Dederlein). Questa composizione dura fino a diverse settimane, mantenendo una reazione acida. Inoltre, il pH diventa neutro e rimane tale fino alla pubertà. In questa fase, la flora include batteri condizionatamente patogeni (corinebatteri, streptococchi, stafilococchi ed enterococchi, anaerobi).

Dopo l'inizio della pubertà e la maggiore influenza degli estrogeni, aumenta la quantità di glicogeno (un substrato per la proliferazione dei lattobacilli). Come risultato dell'ulteriore predominanza dei lattobacilli e della loro produzione di acidi dai carboidrati scomposti, il pH diminuisce a 4,0-4,5.

Il mantenimento del pH delle secrezioni vaginali da parte dei lattobacilli a questo livello garantisce un sano equilibrio della flora, sopprime l'attività dei bacilli opportunistici e mantiene la resistenza naturale.

Livelli di purezza

La divisione in gradi di purezza si basa sugli indicatori qualitativi della microflora e sul rapporto quantitativo tra batteri sani e opportunisti.

La predominanza della flora del lievito è caratteristica del mughetto.

Questa condizione può indicare una violazione della microbiocenosi vaginale dopo un lungo ciclo di antibiotici, citostatici, FANS o ormoni.

In base alla natura dei microrganismi nello striscio, la flora può essere determinata:

• misto (tipico della pubertà, dell'inizio e della fine delle mestruazioni, della menopausa, della sindrome da iperfunzione ovarica, di alcune malattie sessualmente trasmissibili). Per chiarire la diagnosi è necessario contare i leucociti nel campo visivo ed eseguire l'ELISA o la PCR;
• asta (gardnelosi o disbatteriosi vaginale);
• lattobacillare (indicatori completamente sani);
• coccobacillare (malattie venose, vaginosi batterica).

Coltura in vasca per la flora con determinazione della sensibilità agli antibiotici: interpretazione, norme.

Il metodo più semplice da eseguire e più comune nella pratica clinica è il metodo di diffusione di dischi di carta standard imbevuti di farmaci antibatterici in una capsula Petri riempita con un mezzo nutritivo. I dischetti si adagiano sulla superficie dell'agar, mantenendo una distanza di due centimetri dal bordo della piastra e l'uno dall'altro.

Dopo che la ciotola è rimasta a temperatura ambiente, viene spostata nel termostato.

Il tempo di permanenza nel termostato è diverso per ciascun rappresentante della flora. Il periodo di incubazione standard va dai tre ai cinque giorni.

• l'assenza di ritardo della crescita indica la completa resistenza del microbo all'agente utilizzato;
• un anello attorno a un disco di carta, fino a 1,5 cm di diametro, indica una reazione debole. Anche questo farmaco non sarà efficace nel trattamento;
• la zona da 1,5 a 2,5 cm indica sensibilità standard ed efficacia clinica moderata;
• ipersensibilità al farmaco, caratterizzata da un'area superiore a 2,5 cm.

Esempio

Al paziente è stata diagnosticata la clamidia. Per la terapia empirica, in questo caso, si consiglia l'Azitromicina ® o la Doxiciclina ®. La scelta è stata fatta sul primo farmaco. Il trattamento è iniziato. Clinicamente le condizioni del paziente sono migliorate.

Nei risultati della semina:

Interpretazione della coltura per la microflora e la sensibilità agli antibiotici:

Questi risultati mostrano che il trattamento è stato scelto correttamente.

• l'agente patogeno è altamente sensibile all'Azitromicina ® e anche l'Eritromicina ® e la Josamicina ® potrebbero essere utilizzate per il trattamento;
• è accettabile una sensibilità moderata alla Dokycycline ®;
• resistenza a Levofloxacina ®, Ofloxacina ®, Moxifloxacina ®, Amoxicillina/clavulanato ®;
• resistenza assoluta al Ceftriaxone ® .

Esecuzione di un E-test

La determinazione della sensibilità agli agenti antimicrobici è simile al metodo di diffusione su disco, tuttavia, invece dei dischi inumiditi con agenti antibatterici, viene inserita nell'agar una striscia E-test. Segna diversi livelli di concentrazione di antibiotico, che vanno dal massimo al minimo.

La concentrazione minima di inibizione viene determinata all'intersezione tra la striscia reattiva e la zona di inibizione della crescita.

Questo metodo è semplice, ma piuttosto costoso, pertanto la diffusione su disco viene utilizzata più spesso.

Spesso nella pratica medica ai pazienti viene prescritta una coltura della flora per determinare la sensibilità agli antibiotici. Allo stesso tempo, i pazienti stessi incontrano difficoltà nella preparazione al test e non tutti capiscono a cosa serve. Vi diremo di più su questo tipo di ricerca di laboratorio più avanti nell'articolo.

Cos'è la coltura della microflora?

La coltura della microflora, nota anche come coltura in vasca, nota anche come coltura antibiotica, è un test di laboratorio che può essere utilizzato per determinare il tipo di agente infettivo, la sua concentrazione nel corpo e la resistenza ai farmaci. Queste informazioni consentono ai medici di diagnosticare con precisione la malattia e pianificare una strategia di trattamento nel modo più efficace possibile.

La semina batteriologica può essere effettuata utilizzando diverse tipologie di substrato. A seconda della sospetta malattia o dell'organo colpito, quasi tutti i fluidi biologici possono essere utilizzati come materiale di ricerca: sangue, eiaculato, secrezioni di varie mucose, liquido cerebrospinale e liquido articolare, contenuto di formazioni patologiche (ulcere, cisti), urina, eccetera. .

Bakposev consiste nel seminare batteri da un campione (materiale diagnostico) in un mezzo nutritivo con successiva osservazione dei cambiamenti quantitativi nelle colonie batteriche. Il calcolo dei risultati è determinato in CFU - unità formanti colonie, vale a dire il numero di cellule batteriche vitali in grado di formare nuove colonie.

Dove viene utilizzato il metodo di coltura della microflora?

Secondo vari materiali per la ricerca, nei risultati possono essere rilevati diversi tipi di agenti patogeni. Ad esempio, la coltura delle feci può mostrare gruppi di batteri come salmonella, shigella, batteri tifoidi, batteri anaerobici. Spesso, la coltura delle feci per la disbatteriosi e la determinazione della sensibilità agli antibiotici viene eseguita in pazienti che manifestano disturbi intestinali dopo l'uso a lungo termine di antibiotici orali. Decifrare questa analisi consente di distinguere i disturbi intestinali infettivi dalla disbiosi.

Nelle pratiche venereologiche, ginecologiche e urologiche viene utilizzata l'analisi del muco urogenitale per la coltura batterica. In questo tipo di materiale analizzato, oltre ai batteri, possono essere rilevati funghi. Tra i gruppi batterici, i più probabili da rilevare sono i goococchi, la listeria, l'ureaplasma e, se un batterio specifico infezione trasmessa sessualmente il medico può prescrivere una coltura per il micoplasma o un'altra coltura batteriologica.

Spesso nelle pratiche terapeutiche e pneumologiche generali, l'espettorato viene coltivato per la microflora e la sensibilità agli antibiotici. Questa analisi permette di stabilire la vera causa della bronchite e di separare le forme infettive da quelle allergiche e da altre. Come materiale analizzato viene utilizzato l'espettorato separato durante l'espettorazione.

I fluidi corporei come il latte materno, il sangue, l'urina, la bile, il liquido articolare sono di natura sterile, quindi vengono coltivati ​​per la contaminazione, ad es. per identificare eventuali forme di batteri, perché in ogni caso saranno patologici.

Separatamente, va menzionata la semina dell'eiaculato o, in altre parole, dello sperma per la flora. La coltura dello sperma viene utilizzata nella pratica urologica e può rilevare efficacemente le infezioni a trasmissione sessuale. Possono essere utilizzate sia la coltura per la contaminazione della flora dell'eiaculato che l'analisi per la presenza di un agente patogeno specifico, ad esempio la coltura per la clamidia con determinazione della sensibilità batteriologica agli antibiotici.

Come funziona il processo diagnostico?

Dopo aver raccolto materiale diagnostico per la flora e la sensibilità agli antibiotici, viene “seminato” in vari mezzi nutritivi. La scelta dell'ambiente è determinata dalle capacità di un particolare laboratorio diagnostico, nonché dagli obiettivi della diagnosi. Ad esempio, per determinare la presenza di un agente patogeno specifico, viene utilizzato l'ambiente più adatto e vengono utilizzati mezzi diagnostici differenziali per distinguere tra diversi agenti patogeni. Il terreno di coltura solido viene utilizzato per identificare diverse colonie batteriche.

Dopo aver seminato la flora per la sensibilità agli antibiotici, il substrato viene posto in un termostato, che funziona con i valori specificati di temperatura, umidità e tempo. Successivamente, le colonie di antibiotici risultanti vengono estratte, colorate e vengono eseguiti un conteggio di controllo e un'ispezione. Se è necessario contare quantitativamente i batteri, il substrato viene diluito più volte di seguito, dopodiché viene valutata la coltura (o le colture) determinata di batteri nel loro insieme.

I pazienti spesso si chiedono perché ci vuole tempo in laboratorio per eseguire una coltura della flora per determinare la sensibilità a una gamma estesa di antibiotici. a lungo(fino a 10 giorni, ad esempio, quando si esegue il test di sterilità del sangue). Ciò è dovuto alla specificità della crescita batterica: il processo di maturazione nel termostato non può essere accelerato senza il rischio di morte della colonia. Inoltre, se è necessaria l'analisi quantitativa di diverse specie di batteri, questa richiede molto tempo a causa dell'elaborazione quantitativa dei risultati.

Come raccogliere correttamente il materiale per l'analisi?

I requisiti per i pazienti che inviano materiale per l'analisi sono elevati quanto quelli per gli assistenti di laboratorio in un istituto medico. La semina per identificare i batteri richiede molta attenzione in relazione al materiale da testare, perché Se la sterilità non viene mantenuta, i batteri verranno contaminati e non avranno alcun significato clinico e il risultato del test sarà alterato. Pertanto, il primo requisito è l'uso di contenitori sterili specializzati.

La seconda è che il materiale diagnostico, se per qualche motivo viene ritirato fuori dal laboratorio, deve essere ivi consegnato nel più breve tempo possibile. Quanto più fresco è il terreno da testare, tanto maggiore è la possibilità di ottenere un risultato del test clinicamente corretto. Tale norma prevede la priorità di prelievo del materiale direttamente nel laboratorio, o nelle immediate vicinanze dello stesso.

La terza cosa è che il personale che raccoglie il materiale per l'analisi deve possedere determinate competenze. Ciò riguarda i due punti precedenti: il mantenimento della sterilità del materiale raccolto e la rapidità del suo invio alla ricerca. Inoltre, la coltura stessa e il conteggio delle CFU possono essere eseguiti solo da personale altamente qualificato.

Requisiti per la raccolta del materiale diagnostico

La raccolta delle urine per l'analisi deve essere effettuata al mattino, dopo le procedure igieniche degli organi genitali, in contenitori sterili. È soggetta a raccolta la prima porzione di urina mattutina, il cui volume deve essere compreso tra 10 e 15 ml. Il materiale dovrà essere inviato entro e non oltre 2 ore dal ricevimento.

Le feci vengono raccolte al mattino, senza l'uso di clisteri o lassativi, utilizzando una spatola sterile in un contenitore sterile. Il volume del materiale raccolto dovrebbe essere di 15-30 g. Le feci possono essere donate entro 5 ore dalla raccolta, ma non devono essere raffreddate o congelate, perché questo può portare alla morte dei batteri.

Se viene prescritto un test per un tampone dal naso e dalla gola, non è consentito lavare queste mucose con soluzioni antibatteriche, bere, mangiare o lavarsi i denti prima di eseguire il test. Immediatamente dopo la raccolta in laboratorio, il materiale diagnosticato viene inviato per l'esame. Al contrario, se al paziente è indicato un test dell'espettorato, allora deve lavarsi i denti e sciacquarsi regolarmente la bocca con una soluzione antibatterica prima di sottoporre il materiale.

Quando si controlla la sterilità del sangue, non è consentita la pre-somministrazione di antibiotici. Il materiale viene raccolto in laboratorio, nel rispetto delle norme di sterilità. Latte materno Puoi ritirarlo anche a casa o in reparto. Per fare ciò, vengono prima eseguite le procedure di igiene dell'acqua, quindi la pelle attorno al capezzolo viene trattata con una soluzione disinfettante e il latte viene spremuto in un contenitore sterile. Deve essere consegnato al laboratorio entro 2 ore.

Nel mezzo viene eseguito uno striscio degli organi genitali per le donne ciclo mestruale(non prima di 14 giorni dopo la fine delle mestruazioni). Allo stesso tempo, prima del test, le donne non dovrebbero urinare per 2 ore, gli uomini – 5-6 ore. Il campione viene prelevato da un medico. Allo stesso modo, la raccolta dell'eiaculato deve essere effettuata in condizioni sterili.

Risultati della coltura della flora

Quando viene rilevata una coltura batterica specifica, la reazione normale sarà un risultato che può essere indicato dalle parole “nessuna crescita” o “i risultati del campione sono negativi”. Se è stata determinata la microflora di una sostanza nel suo insieme, la designazione "normale" è un buon segno. La sensibilità agli antibiotici viene indicata elencando i farmaci testati e le parole “sì” e “no” che indicano la presenza o l'assenza di efficacia per un particolare farmaco.

Nell'esprimere i valori dei batteri in CFU è necessario distinguere tra indicatori di flora patogena e opportunistica. Quest'ultimo può variare ampiamente nei suoi parametri senza causare alcun danno al corpo umano. Per gli indicatori normali, accanto al valore quantitativo è indicata la parola “norma”. Nel caso della flora patogena, la “norma” perde il suo significato, perché Gli organismi patogeni, in linea di principio, non dovrebbero essere presenti in un corpo sano e il valore delle CFU qui diventa irrilevante.

In un modo o nell'altro, è meglio affidare l'interpretazione dei risultati ottenuti al proprio medico curante, poiché sa esattamente quale era lo scopo della diagnosi e come utilizzare questi risultati in futuro. In generale, va notato che la coltura della flora è uno dei test di laboratorio più accurati, anche se ad alta intensità di lavoro, che consente di diagnosticare e prevedere la malattia, nonché di sviluppare tattiche efficaci per il suo trattamento.

La coltura della microflora è uno studio di laboratorio sul materiale biologico seminandolo su un mezzo nutritivo. Lo scopo dello studio è rilevare organismi patogeni o condizionatamente patogeni nel materiale studiato, nonché risolvere ulteriormente i problemi della terapia specifica.

Se viene rilevata una determinata microflora, viene prescritta una seconda analisi, non meno importante: un antibiogramma o una determinazione della sensibilità della flora identificata agli antibiotici e ai batteriofagi.

I principali vantaggi della semina batterica per la microflora includono:

• Elevata specificità della tecnica.
• La capacità di studiare assolutamente qualsiasi fluido biologico umano, sia uomini che donne. Analisi batteriologica di urina, feci, coltura batterica vaginale: tutto questo viene esaminato attraverso la coltura del terreno.
• L'obiettivo terapeutico è identificare la sensibilità dei microrganismi rilevati all'uno o all'altro medicinale consente di eseguire prescrizioni terapeutiche con elevata precisione.

Per quanto riguarda le carenze, sono insignificanti, ma esistono. Questi includono: la durata dell'ottenimento dei risultati, maggiori requisiti per la raccolta del materiale e requisiti per le qualifiche dei lavoratori.

Condizioni di crescita microbica

La microflora, una volta in buone condizioni, cresce e si riproduce attivamente. Questa è la legge della natura e non abbiamo il diritto di influenzarla. Quando questi processi avvengono nel corpo umano, si nota lo sviluppo della malattia. Ciò è dovuto ai cambiamenti nella microflora. L'identificazione dell'agente patogeno, la sua varietà e concentrazione e la risposta ai farmaci possono essere effettuate utilizzando la coltura batterica per la microflora.

Altri metodi diagnostici non sempre identificano accuratamente l'agente patogeno e danno anche risultati falsi positivi o falsi negativi. Ogni tipo di batterio ha bisogno di determinate condizioni per vivere. L'umidità, l'acidità e la viscosità devono essere adeguate.

In laboratorio, per determinare il tipo di organismo patologico, viene seminato su un terreno speciale. Ci sono ambienti in cui diversi possono crescere contemporaneamente. vari tipi microrganismi. Si chiamano universali. Questi includono il tioglicolato e il mezzo di Sabouraud. Altri sono destinati esclusivamente a un ceppo. Ad esempio, la flora streptococcica e stafilococcica viene seminata esclusivamente su agar salino o sangue.

Coltura della microflora: per chi è indicata?

Questa tecnica è abbastanza comune in medicina. La sua attuazione è prescritta se si sospetta la presenza di flora dannosa che ha provocato lo sviluppo di un processo infiammatorio o infettivo. Questa tecnica è comune in ginecologia, oncologia, urologia e chirurgia. L'indicazione principale per lo studio è la patologia infiammatoria o il sospetto di un processo settico.

La semina batterica non viene mai effettuata in modo indipendente. Questa tecnica è prescritta esclusivamente da un medico e solo se si sospetta la presenza di flora patogena.

I principali tipi di metodi includono: coltura per flora stafilococcica, ureaplasma, micoplasma, clamidia, coltura per batteri da una ferita, coltura urogenitale. Per l'analisi può essere prelevato qualsiasi liquido: muco dal rinofaringe, muco dal tratto respiratorio superiore, un campione di feci, perdite vaginali, secrezioni dal canale cervicale e dall'uretra, urina, sangue, contenuto di ferite, focolai infiammatori.

Scopo e valore della semina batterica

Gli organismi patogeni che penetrano nelle mucose e nel derma sono divisi in diversi gruppi. Tra questi si distinguono la microflora normale, opportunistica e patogena (patogena).

1. La microflora normale si riferisce a microrganismi considerati residenti permanenti e innocui. Questa è la norma. La presenza di tale flora contribuisce al corretto funzionamento del corpo umano. In presenza di una normale microflora, tutti i sistemi e gli organi, in particolare il tratto gastrointestinale, funzionano in modo armonioso e corretto. Una carenza di questi organismi può portare allo sviluppo di vaginosi batterica o disbatteriosi.
2. Per quanto riguarda la relativa flora opportunistica, è soggetta a forte sistema immunitario sicuro per il corpo. Una diminuzione delle difese dell'organismo provoca l'attivazione, la crescita e la riproduzione dei batteri, nonché lo sviluppo di malattie.
3. La microflora patogena non vive in un corpo sano. Viene popolato, di regola, quando infetto.

Il metodo colturale e l'antibiogramma sono di notevole importanza per identificare i microrganismi, il loro ceppo e varietà. Questa tecnica è importante per diagnosticare patologie infettive e disturbi PPP. Un antibiogramma significa identificare la sensibilità di un batterio rilevato a un farmaco specifico che ha proprietà antibatteriche. L'antibioticogramma è considerato parte integrante di uno studio batteriologico; è un insieme di farmaci ai quali l'agente patogeno è resistente o sensibile.

Per essere più chiari, la suscettibilità di un microrganismo si riferisce alla sua sensibilità al farmaco, cioè a come l'antibiotico influenzerà la crescita dell'organismo. Per resistenza si intende la resistenza della flora ad un farmaco. Cioè, l'agente antibatterico in questo caso non funzionerà. Quando viene identificato un ceppo di microflora dannosa, viene seminato in laboratorio su un terreno con un farmaco antibatterico. Sugli ambienti in cui la crescita del corpo è insignificante o del tutto negativa, i medici prendono appunti in forme speciali.

Questi antibiotici sono i più efficaci nel trattamento della malattia. Poiché la tecnica della coltura è un processo piuttosto lungo (almeno una settimana), vengono prima prescritti farmaci con un ampio spettro d'azione. La maggior parte degli organismi patogeni sono resistenti a un particolare farmaco, il che significa che l’uso settimanale potrebbe non essere efficace.

Grazie all'antibiogramma, decifrato da uno specialista, è possibile selezionare l'unico farmaco efficace. La forma indica la varietà, il ceppo e la concentrazione dell'agente patogeno, nonché i nomi degli antibiotici che indicano la sensibilità R, S, I e zona. S significa che il batterio è resistente al farmaco, I indica un'attività moderata del microbo e R indica la sensibilità del batterio a un dato farmaco antibatterico.

Semina in vasca per flora: come si effettua la preparazione e come si effettua la semina batterica in laboratorio

Il materiale per la diagnosi può essere qualsiasi fluido del corpo umano: sangue, urina, eiaculato, feci, espettorato, perdite vaginali. Spesso, specialisti nel campo della ginecologia e dell'urologia prescrivono una coltura in vasca per la flora. Ad esempio, uno striscio vaginale o cervicale (se si sospetta una vaginosi).

Per ottenere il risultato giusto, devi prepararti. La regola di base è la sterilità dei contenitori e degli strumenti. Il mancato rispetto di questa regola è irto di contaminazione, pertanto lo studio sarà inutile. I contenitori sterili vengono utilizzati per raccogliere il biomateriale. Viene distribuito ai pazienti. Il materiale viene raccolto dai focolai infiammatori utilizzando strumenti sterili e solo da specialisti qualificati, spesso un infermiere in una sala esami o malattie infettive.

Il sangue e l'urina vengono raccolti in provette asciutte e gli altri liquidi vengono raccolti in contenitori con mezzi nutritivi. La prossima regola altrettanto importante è che il materiale deve essere raccolto prima dell'inizio della terapia antibatterica. È necessario portare o portare il materiale in ospedale nel più breve tempo possibile. La microflora può morire a causa dei cambiamenti di acidità o dell'essiccamento. Il campione di feci viene consegnato caldo.

In caso di tampone del naso e della gola (ad esempio nella sinusite), al mattino è vietato lavarsi i denti e sciacquarsi naso e bocca, nonché consumare cibi o liquidi. Per la semina in vasca della flora urinaria, viene prelevata una porzione media di materiale: quindici millilitri. Prima di raccogliere l'urina è necessario eseguire le procedure igieniche. È necessario portare il liquido per la prova due ore prima. Le feci vengono raccolte al mattino utilizzando una spatola.

Il materiale (20 grammi) viene posto in un contenitore sterile e consegnato all'ospedale entro cinque ore. Le feci non possono essere conservate o congelate per la coltura della flora. Inoltre, non dovresti assumere lassativi o fare clisteri prima del movimento intestinale. Si consiglia il prelievo di sangue prima di iniziare la terapia antibatterica. Cinque millilitri vengono prelevati dai bambini e quindici millilitri dagli adulti.

Il muco del tratto respiratorio superiore viene raccolto immediatamente dopo il risveglio a stomaco vuoto in un contenitore sterile. Prima di raccogliere il materiale, si consiglia di lavarsi i denti e sciacquarsi la bocca con acqua bollita e raffreddata.È necessario portare l'espettorato in una struttura medica entro un'ora. Il latte materno viene prelevato dopo aver trattato la zona del capezzolo con un tampone imbevuto di alcool.

Devi esprimere venti millilitri di latte e i successivi cinque millilitri vengono presi per l'analisi. Si consiglia di consegnare il latte all'ospedale entro due ore. Le secrezioni degli organi genitali della metà più debole della società vengono raccolte due settimane dopo le mestruazioni, non prima. Inoltre, durante l'assunzione di antibiotici non è possibile effettuare la raccolta delle secrezioni. Si consiglia agli uomini di non andare in bagno per cinque ore prima di raccogliere il materiale.

Come realizzare una semina in vasca sulla flora in laboratorio

Il liquido da testare viene prima seminato su un mezzo nutritivo. A seconda della ricerca desiderata dei batteri, l'inoculazione viene effettuata su diversi terreni. Quindi, ad esempio, per la crescita di un determinato organismo (la crescita di altri è inibita), viene utilizzato un ambiente selettivo.

Ad esempio, il siero di cavallo coagulato viene utilizzato per identificare i batteri che provocano lo sviluppo della difterite e un mezzo con sali biliari viene utilizzato per identificare i microrganismi che provocano lo sviluppo di patologie intestinali.

Il prossimo esempio sono gli ambienti diagnostici differenziali. Sono usati per decifrare una coltura batterica. La fase successiva è posizionare il mezzo nutritivo con gli organismi in un termostato. Rimangono lì per un po' di tempo.

Successivamente viene effettuata un'ispezione di controllo delle colonie, durante la quale vengono valutati la forma, il colore e la densità della coltura. Successivamente vengono contati gli agenti patogeni. Lo studio utilizza il concetto di unità formante colonie, che significa una cellula microbica. La concentrazione di batteri è determinata dalle CFU.

Analisi della coltura in vasca: coltura durante la gravidanza, coltura del campione di feci, interpretazione dei risultati

Il risultato dell'analisi dell'inoculazione nel serbatoio consiste in una valutazione qualitativa (la presenza stessa della flora nel materiale) e quantitativa dei microrganismi nel liquido di prova. Il risultato è decifrato in questo modo. In totale, ci sono quattro gradi di contaminazione batterica nel materiale biologico in esame (sperma, urina, sangue, espettorato).

Primo grado: si osserva una crescita molto lenta della flora. Cresce esclusivamente in un ambiente liquido. Per quanto riguarda il secondo grado, qui osserviamo la crescita della microflora di una specie separata (fino a dieci colonie) esclusivamente su un mezzo denso. Per quanto riguarda il terzo, qui la flora cresce (10-100 colonie) su un mezzo nutritivo solido. Per quanto riguarda quest'ultimo si registra una crescita di oltre 100 colonie su terreno solido. Il primo e il secondo grado sono evidenza di “microflora contaminata”. Il terzo e il quarto grado segnalano l'infiammazione provocata da questo tipo di flora.

Serbatoio per la coltura delle feci

I batteri vivono costantemente nel tratto gastrointestinale, favorendo la normale digestione, nonché la sintesi di enzimi e vitamine. Il rapporto tra i microrganismi è costante, ma può variare. Una diminuzione delle difese del corpo, la penetrazione della microflora dannosa, l'uso prolungato di farmaci antibatterici: tutto ciò è irto di uno squilibrio. C'è una diminuzione della concentrazione di lattobatteri e bifidobatteri benefici. Il loro posto è preso dalla flora patogena, come la Protea o l'E. coli. Le feci per l'analisi per la coltura in vasca vengono prelevate in un contenitore sterile e inviate al laboratorio. Il risultato può essere scoperto dopo cinque-sette giorni.

Durante la gravidanza

L'analisi della coltura dell'acquario durante la gravidanza è un metodo diagnostico obbligatorio. Viene effettuato due volte: al momento della registrazione e alla 36a settimana. Viene effettuato uno striscio dalla vagina o dalla cervice, nonché dal rinofaringe e dalla faringe. In questo modo si determina la presenza di un'infiammazione nel sistema riproduttivo e il trasporto di un microrganismo come lo Staphylococcus aureus. L'oggetto della ricerca durante la gravidanza è la microflora patogena: trichomonas, ureaplasma, micoplasma, clamidia.

Se viene rilevata una flora patogena, la terapia viene eseguita immediatamente. L'identificazione tardiva dei microrganismi, così come la mancanza di terapia, possono portare all'infezione del feto. Le tattiche terapeutiche, il regime e il corso sono selezionati esclusivamente da uno specialista qualificato. La coltura batterica e l'antibiogramma sono metodi diagnostici indicativi che consentono di identificare con precisione l'agente patogeno e selezionare la terapia corretta.